Ga naar de inhoud
SCLC-21H-cellen
Weefsel
Long
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
SCLC21H

Documenten

SCLC-21H-cellen

Cell line · Productnummer 300225

De SCLC-21H-cellijn is afkomstig uit de pleurale effusie van een patiënt met kleincellige longkanker (SCLC) van het havercel-subtype. Deze cellijn, alleen...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De SCLC-21H cellijn werd afgeleid van de pleurale effusie van een patiënt met kleincellig longkanker (SCLC) van het subtype havercel. Deze cellijn werd samen met SCLC-22H vastgesteld tijdens een periode van chemotherapie, waarbij SCLC-21H de tweede was die werd afgeleid na nog eens 15 dagen behandeling. Hoewel beide cellijnen afkomstig zijn van dezelfde patiënt, vertonen ze significant verschillende biochemische, morfologische en kinetische eigenschappen. SCLC-21H heeft bijvoorbeeld een snellere populatieverdubbeling en een hogere kolonievormende efficiëntie vergeleken met SCLC-22H. Deze verschillen maken van SCLC-21H een bijzonder instrument voor het bestuderen van bepaalde variantvormen van SCLC.

Biochemisch verschilt SCLC-21H van SCLC-22H door de lage of niet-detecteerbare niveaus van belangrijke neuroendocriene markers zoals L-Dopa decarboxylase, bombesine en carcino-embryonisch antigeen. Beide cellijnen brengen echter hoge niveaus van neuron-specifieke enolase en creatinekinase-isoenzym BB tot expressie, wat karakteristieke markers van SCLC zijn. Bovendien vertonen beide cellijnen c-myc amplificatie, maar SCLC-21H bevat een extra herschikt en versterkt EcoRI c-myc fragment, wat het genetisch unieke karakter verder benadrukt.

Structureel vertoont SCLC-21H een losse groei in cultuur en heeft het prominente nucleoli en overvloedig cytoplasma, in tegenstelling tot de meer dicht opeengepakte morfologie van SCLC-22H. De aanwezigheid van ultrastructureel dichte kernkorrels in SCLC-21H bevestigt de neuroendocriene oorsprong en wordt geclassificeerd als een variantvorm van SCLC. Deze duidelijke kenmerken maken SCLC-21H tot een waardevol model voor het onderzoeken van de variantvormen van kleincellige longkanker en het begrijpen van hun respons op chemotherapie.

Weefsel
Long
Ziekte
Carcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pleurale effusie
Synoniemen
  • SCLC21H

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Ja in naakte muizen
Ploïdie
Aneuploïde
Karyotype
Modaal chromosoomnummer 42/43, range 39-44. Chromosoom deletie 3p.
Verdubbelingstijd
45 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
SCLC-21H (Cytion catalogusnummer 300225)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0024

05Expressie en vatbaarheid

Oncogenen
Myc-amplificatie aanwezig, c-myc-expressie hoog

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% geïnactiveerdeFBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Voeg een of twee keer per week 5 ml vers celkweekmedium toe, zodra het kweekmedium zuur wordt. Sucultuur zodra er veel zeer grote clusters worden waargenomen. Ontbind de clusters door de cellen te verzamelen, één keer te spoelen met PBS zonder calcium/magnesium en 3-5 ml Accutase toe te voegen. Incubeer 10 minuten bij 37 graden Celsius. Verzamel de cellen na centrifugeren, resuspendeer ze in vers celkweekmedium en tel ze.
Zaaidichtheid
2 tot 4 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Cellen herstellen binnen 24 tot 48 uur van invriezen.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
46 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch