Mine otse sisu juurde
SCLC-21H rakud
Kude
Kopsud
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
SCLC21H

Dokumendid

SCLC-21H rakud

Cell line · Toote number 300225

Rakuliin SCLC-21H saadi kaerakujulise väikerakk-kopsuvähi (SCLC) patsiendi pleuraefusioonist. See rakuliin, üksi...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SCLC-21H rakuliin on saadud väikse rakulise kopsuvähiga (SCLC) patsiendi pleuraefusioonist, mille alatüüp on kaerarakuline kopsuvähk. See rakuliin koos SCLC-22H-ga loodi keemiaravi ajal, kusjuures SCLC-21H oli teine rakuliin, mis saadi pärast täiendavat 15-päevast ravi. Kuigi mõlemad rakuliinid pärinevad samalt patsiendilt, on neil oluliselt erinevad biokeemilised, morfoloogilised ja kineetilised omadused. Näiteks on SCLC-21H-l kiirem populatsiooni kahekordistumise aeg ja suurem kolooniate moodustamise efektiivsus võrreldes SCLC-22H-ga. Need erinevused muudavad SCLC-21H eriliseks vahendiks SCLC teatavate variantide uurimiseks.

Biokeemiliselt erineb SCLC-21H SCLC-22H-st põhiliste neuroendokriinsete markerite, nagu L-Dopa dekarboksülaasi, bombesiini ja kartsinoembrüonaalse antigeeni madala või mittemääratava taseme poolest. Mõlemad rakuliinid ekspresseerivad siiski neuronispetsiifilise enolaasi ja kreatiinkinaasi isoensüümi BB kõrget taset, mis on SCLC-le iseloomulikud markerid. Kuigi mõlemal rakuliinil esineb c-myc amplifikatsioon, sisaldab SCLC-21H täiendavat ümberkujundatud ja amplifitseeritud EcoRI c-myc fragmenti, mis rõhutab veelgi selle geneetilist eripära.

Struktuuriliselt on SCLC-21H kultuuris lõdva kasvuga ning sellel on silmatorkavad tuumad ja rikkalik tsütoplasma, mis on vastuolus SCLC-22H tihedamalt pakitud morfoloogiaga. Ultrastruktuurselt tihedate tuumakeste olemasolu SCLC-21H-s kinnitab selle neuroendokriinset päritolu ja see liigitatakse SCLC ühe variandivormi esindajaks. Need eripärad teevad SCLC-21H väärtuslikuks mudeliks väikerakk-kopsuvähi variantide uurimiseks ja nende ravivastuse mõistmiseks keemiaravile.

Kude
Kopsud
Haigus
Kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • SCLC21H

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Tuumorigeenne
Jah alasti hiirtel
Ploidsus
Aneuploidne
Karyotüüp
Modaalne kromosoomi number 42/43, vahemik 39-44. Kromosoomi deletsioon 3p.
Kahekordistumisaeg
45 tundi

04Tunnused

Viide
SCLC-21H (Cytioni katalooginumber 300225)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0024

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Onkogeenid
Myc amplifikatsioon, c-myc ekspressioon kõrge

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendatakse söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Lisage kord või kaks korda nädalas 5 ml värsket rakukultuurikeskkonda, niipea kui kultuurikeskkond muutub happeliseks. Suculture niipea, kui on täheldatud palju väga suuri klastreid. Lahutage klastrid, kogudes rakud kokku, loputades neid üks kord kaltsiumi-/magneesiumivaba PBS-ga ja lisades 3-5 ml Accutase'i. Inkubeerige 10 minutit 37 °C juures. Pärast tsentrifuugimist kogutakse rakud kokku, resuspenseeritakse uues rakukultuurikeskkonnas ja loendatakse.
Külvitihedus
2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Rakud taastuvad külmutamisest 24-48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
46 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia