Células SCLC-21H

La línea celular SCLC-21H se derivó del derrame pleural de un paciente con cáncer de pulmón microcítico (CPM) del subtipo de células de avena. Esta línea celular, junto con la SCLC-22H, se estableció durante un periodo de quimioterapia, siendo la SCLC-21H la segunda derivada tras 15 días adicionales de tratamiento. Aunque ambas líneas celulares proceden del mismo paciente, presentan propiedades bioquímicas, morfológicas y cinéticas significativamente diferentes. SCLC-21H, por ejemplo, tiene un tiempo de duplicación de la población más rápido y una mayor eficiencia de formación de colonias en comparación con SCLC-22H. Estas diferencias hacen que SCLC-21H sea una herramienta distinta para estudiar ciertas formas variantes de SCLC.

Desde el punto de vista bioquímico, SCLC-21H difiere de SCLC-22H en sus niveles bajos o indetectables de marcadores neuroendocrinos clave como la L-Dopa descarboxilasa, la bombesina y el antígeno carcinoembrionario. Sin embargo, ambas líneas celulares expresan niveles elevados de enolasa neuronal específica y creatina cinasa isoenzima BB, que son marcadores característicos del SCLC. Además, aunque ambas líneas celulares presentan amplificación de c-myc, SCLC-21H contiene un fragmento de c-myc EcoRI reordenado y amplificado adicional, lo que subraya aún más su singularidad genética.

Estructuralmente, SCLC-21H muestra un crecimiento laxo en cultivo y presenta nucleolos prominentes y abundante citoplasma, lo que contrasta con la morfología más compactada de SCLC-22H. La presencia de gránulos centrales densos desde el punto de vista ultraestructural en el SCLC-21H confirma su origen neuroendocrino, y se clasifica como una variante del SCLC. Estas características distintivas hacen del SCLC-21H un modelo valioso para explorar las formas variantes del cáncer de pulmón de células pequeñas y comprender su respuesta a la quimioterapia.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía