Přejít na obsah
Buňky SCLC-21H
Tkáň
Plíce
Nemoc
Karcinom
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
SCLC21H

Dokumenty

Buňky SCLC-21H

Cell line · Číslo výrobku 300225

Buněčná linie SCLC-21H byla izolována z pleurálního výpotku pacienta s malobuněčným karcinomem plic (SCLC) podtypu „oat cell“. Tato buněčná linie, sama o sobě...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie SCLC-21H byla odvozena z pleurálního výpotku pacienta s malobuněčným karcinomem plic (SCLC) ovesného podtypu. Tato buněčná linie byla spolu s linií SCLC-22H vytvořena v průběhu chemoterapie, přičemž SCLC-21H byla odvozena jako druhá po dalších 15 dnech léčby. Ačkoli obě buněčné linie pocházejí od stejného pacienta, vykazují výrazně odlišné biochemické, morfologické a kinetické vlastnosti. SCLC-21H má například rychlejší dobu zdvojení populace a vyšší účinnost tvorby kolonií ve srovnání s SCLC-22H. Tyto rozdíly činí z SCLC-21H odlišný nástroj pro studium určitých variantních forem SCLC.

Z biochemického hlediska se SCLC-21H liší od SCLC-22H nízkými nebo nedetekovatelnými hladinami klíčových neuroendokrinních markerů, jako je L-Dopa dekarboxyláza, bombesin a karcinoembryonální antigen. Obě buněčné linie však exprimují vysoké hladiny neuron-specifické enolázy a izoenzymu kreatinkinázy BB, což jsou charakteristické markery SCLC. Obě buněčné linie navíc vykazují amplifikaci c-myc, SCLC-21H však obsahuje další přestavěný a amplifikovaný EcoRI fragment c-myc, což dále zdůrazňuje jeho genetickou jedinečnost.

Z hlediska struktury vykazuje SCLC-21H volný růst v kultuře a vyznačuje se výraznými jádry a hojnou cytoplazmou, což kontrastuje s těsnější morfologií SCLC-22H. Přítomnost ultrastrukturálně hustých jaderných granulí u SCLC-21H potvrzuje jeho neuroendokrinní původ a je klasifikován jako představitel variantní formy SCLC. Díky těmto odlišným rysům je SCLC-21H cenným modelem pro zkoumání variantních forem malobuněčného karcinomu plic a pochopení jejich odpovědi na chemoterapii.

Tkáň
Plíce
Nemoc
Karcinom
Místo metastázy
Pleurální výpotek
Synonyma
  • SCLC21H

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Tumorogenní
Ano u nahých myší
Ploidní stav
Aneuploidní
Karyotyp
Modální číslo chromozomu 42/43, rozsah 39-44. Delece chromozomu 3p.
Doba zdvojnásobení
45 hodin

04Identifikátory

Citace
SCLC-21H (katalogové číslo Cytion 300225)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0024

05Exprese a náchylnost

Onkogeny
Amplifikace Myc přítomna, exprese c-myc vysoká

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % tepelně aktivované FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Jednou nebo dvakrát týdně přidejte 5 ml čerstvého kultivačního média, jakmile se kultivační médium okyselí. Sukultujte, jakmile se objeví mnoho velmi velkých shluků. Disociujte shluky odebráním buněk, jednorázovým opláchnutím pomocí PBS bez vápníku/hořčíku a přidáním 3-5 ml Accutase. Inkubujte 10 minut při 37 °C. Po odstředění buňky seberte, resuspendujte v čerstvém médiu pro kultivaci buněk a spočítejte.
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Buňky se zotaví ze zmrazení během 24 až 48 hodin.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme 50% základní médium + 40% FBS + 10% DMSO nebo CM-1 (katalogové číslo Cytion 800100), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu vyvolaného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
46 let
Etnická příslušnost
Kavkazský