
- Tissue
- קולון
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Synonyms
- Colo-320, Colo 320, COLO #320, COLO320, Colo320, CoLo320, Co320, COLO 320F, Colorado 320, COLO 320
Documents
COLO-320
Cell line · Product number 305315
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
COLO-320 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה של המעי הגס האנושי, שמקורו בגידול גרורתי. הוא נמצא בשימוש נרחב במחקר לחקר הביולוגיה של סרטן המעי הגס, מנגנוני עמידות לתרופות והשפעותיהם של חומרים נוגדי סרטן. תאי COLO-320 מאופיינים בביטוי-יתר של אונקוגנים שונים, כגון c-myc, הידוע כגורם המניע את התרבות התאים. קו תאים זה משמש גם כמודל לחקר תפקידן של שינויים אפיגנטיים בהתקדמות הסרטן, שכן הוא מציג לעתים קרובות חריגות במתילציה של ה-DNA ובאצטילציה של ההיסטונים, המשפיעות על הביטוי של גנים מדכאי-גידול מרכזיים ושל רגולטורים של מחזור התא.
מחקר על COLO-320 גילה כי מצב המתילציה של הפרומוטור של CDKN2A (p16) הוא גורם קריטי בוויסות גן מדכא הגידול הזה, האחראי לעיכוב המעבר משלב G1 לשלב S במחזור התא. הוכח כי טיפול במעכבי מתיל-טרנספראז DNA כגון 5-aza-2'-deoxycytidine (5-aza-dC) מפרק את המתילציה של הפרומוטור של CDKN2A, משחזר את ביטוי הגן ועשוי לגרום לעצירת הצמיחה. יתר על כן, מעכבי היסטון-דה-אצטילאז (HDACis) כגון טריכוסטטין A (TSA) יכולים לווסת את רמות האצטילציה של ההיסטונים, ובכך להשפיע על הביטוי של גנים אחרים, כולל p21WAF1. עם זאת, מחקרים הצביעו על כך שאצטילציה של היסטונים משפיעה באופן ספציפי על p21WAF1 מבלי להשפיע באופן משמעותי על היסטונים הקשורים ל-CDKN2A, דבר המרמז על ויסות אפיגנטי דיפרנציאלי.
תחום מחקר נוסף מתמקד בתפקידו של COLO-320 בעמידות לתרופות מרובות (MDR). קו התאים שימש להערכת היעילות של מודולטורים שונים של MDR. נגזרות פנותיאזין, למשל, הפגינו יכולת לעכב את פעילות ה-P-גליקופרוטאין (P-gp) – חלבון שבדרך כלל מבוטא יתר על המידה בתאי COLO-320, ואשר שואב החוצה תרופות כימותרפיות, ובכך מפחית את ריכוזן התאי ואת יעילותן. במחקרים נעשה שימוש בציטומטריית זרימה בשילוב עם בדיקות זרימה של רודמין 123 כדי לכמת את יעילותם של תרכובות אלו בהפחתת העמידות לתרופות מרובות (MDR), ובכך לספק תובנות לגבי אסטרטגיות פוטנציאליות להתגברות על עמידות לתרופות בסרטן המעי הגס.
- Tissue
- קולון
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Synonyms
- Colo-320
- Colo 320
- COLO #320
- COLO320
- Colo320
- CoLo320
- Co320
- COLO 320F
- Colorado 320
- COLO 320
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent and suspension
- Biosafety level
- 1
03Identifiers
- Citation
- COLO-320 (מספר קטלוג של Cytion: 305315)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1989
04Expression and susceptibility
- Mutational profile
- מוטציה: TP53, p.Arg248Trp (c.742C>T)
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- יש להוסיף למדיום 10% FBS, 2.5 גרם/ליטר גלוקוז, 10 מ"מ HEPES
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Seeding density
- 2–4 × 10⁴ תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- 55 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
09Product details
- Composition table