COLO-320

COLO-320 on metastaattisesta kasvaimesta peräisin oleva ihmisen paksusuolen adenokarsinooman solulinja. Sitä käytetään laajasti tutkimuksessa paksusuolisyövän biologian, lääkeresistenssimekanismien ja syöpälääkkeiden vaikutusten selvittämiseen. COLO-320-soluille on ominaista erilaisten onkogeenien, kuten solujen lisääntymistä edistävän c-myc-geenin, yli-ilmentyminen. Tämä solulinja toimii myös mallina, jolla tutkitaan epigeneettisten muutosten roolia syövän etenemisessä, sillä siinä esiintyy usein DNA:n metylaatio- ja histoniasetylaatiohäiriöitä, jotka vaikuttavat keskeisten kasvainten estäjägeenien ja solusyklin säätelijöiden ilmentymiseen.

COLO-320-solulinjaa koskevat tutkimukset ovat paljastaneet, että CDKN2A (p16)-promoottorin metylaatiotila on kriittinen tekijä tämän kasvainten estäjägeenin säätelyssä; geeni on vastuussa solusyklin G1/S-vaiheen siirtymän estämisestä. 5-aza-2’-deoksisytidiinin (5-aza-dC) kaltaisten DNA-metyylitransferaasi-inhibiittoreiden on osoitettu demetyloivan CDKN2A-promoottoria, palauttavan geenin ilmentymisen ja mahdollisesti indusoivan kasvun pysähtymisen. Lisäksi histonideasetylaasi-inhibiittorit (HDAC-inhibiittorit), kuten trikostatiini A (TSA), voivat moduloida histonien asetylaatiotasoja, mikä vaikuttaa muiden geenien, kuten p21WAF1:n, ilmentymiseen. Tutkimukset ovat kuitenkin osoittaneet, että histoniasetylaatio vaikuttaa nimenomaan p21WAF1:een ilman, että se vaikuttaisi merkittävästi CDKN2A:han liittyviin histoneihin, mikä viittaa erilaiseen epigeneettiseen säätelyyn.

Toinen tutkimusalue keskittyy COLO-320-solulinjan rooliin monilääkeresistenssissä (MDR). Solulinjaa on käytetty erilaisten MDR-modulaattoreiden tehokkuuden arviointiin. Esimerkiksi fenotiatsiinijohdannaisilla on osoitettu kykyä estää P-glykoproteiinin (P-gp) toimintaa; kyseessä on proteiini, jota ilmentyy usein liikaa COLO-320-soluissa ja joka pumppaa kemoterapeuttisia lääkkeitä ulos soluista, mikä alentaa niiden solunsisäistä pitoisuutta ja tehokkuutta. Tutkimuksissa on hyödynnetty virtaussytometriaa ja rodamiini 123:n effluksimäärityksiä näiden yhdisteiden tehokkuuden kvantifioimiseksi monilääkeresistenssin kumoamisessa, mikä on tarjonnut näkemyksiä mahdollisista strategioista kolorektaalisyövän lääkeresistenssin voittamiseksi.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa