Preskoči na vsebino
COLO-320
Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
Colo-320, Colo 320, COLO #320, COLO320, Colo320, CoLo320, Co320, COLO 320F, Colorado 320, COLO 320

Dokumenti

COLO-320

Cell line · Številka izdelka 305315

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

COLO-320 je človeška celična linija adenokarcinoma debelega črevesa, pridobljena iz metastatskega tumorja. V raziskavah se pogosto uporablja za preučevanje biologije raka debelega črevesa, mehanizmov odpornosti na zdravila ter učinkov protirakavih sredstev. Za celice COLO-320 je značilna prekomerna ekspresija različnih onkogenov, kot je c-myc, za katerega je znano, da spodbuja celično proliferacijo. Ta celična linija je tudi model za preučevanje vloge epigenetskih sprememb pri napredovanju raka, saj kaže pogoste nepravilnosti pri metilaciji DNA in acetilaciji histonov, ki vplivajo na izražanje ključnih tumor supresorskih genov in regulatorjev celičnega cikla.

Raziskave na liniji COLO-320 so pokazale, da je stanje metilacije promotorja gena CDKN2A (p16) ključni dejavnik pri regulaciji tega tumor supresorskega gena, ki je odgovoren za zaviranje prehoda iz faze G1 v fazo S v celičnem ciklu. Pokazalo se je, da zdravljenje z zaviralci metiltransferaze DNA, kot je 5-aza-2’-deoksicitidin (5-aza-dC), demetilira promotor CDKN2A, s čimer se obnovi izražanje gena in potencialno povzroči zaustavitev rasti. Poleg tega lahko zaviralci histonske deacetilaze (HDACi), kot je trichostatin A (TSA), modulirajo stopnje acetilacije histonov, kar vpliva na izražanje drugih genov, vključno s p21WAF1. Vendar so študije pokazale, da acetilacija histonov specifično vpliva na p21WAF1, ne da bi bistveno vplivala na histone, povezane z CDKN2A, kar kaže na diferencialno epigenetsko regulacijo.

Drugo področje raziskav se osredotoča na vlogo celične linije COLO-320 pri multirezistenci na zdravila (MDR). Ta celična linija se je uporabljala za ocenjevanje učinkovitosti različnih modulatorjev MDR. Derivati fenotiazina so na primer pokazali sposobnost zaviranja aktivnosti P-glikoproteina (P-gp), beljakovine, ki je v celicah COLO-320 pogosto prekomerno izražena in ki izčrpava kemoterapevtska zdravila, s čimer zmanjšuje njihovo intracelularno koncentracijo in učinkovitost. V študijah so z uporabo pretočne citometrije in testov izločanja z rodaminom 123 količinsko ocenili učinkovitost teh spojin pri odpravljanju MDR, kar je omogočilo vpogled v potencialne strategije za premagovanje odpornosti na zdravila pri raku debelega črevesa in danke.

Tkivo
Debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
  • Colo-320
  • Colo 320
  • COLO #320
  • COLO320
  • Colo320
  • CoLo320
  • Co320
  • COLO 320F
  • Colorado 320
  • COLO 320

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Adhezivni in suspenzijski
Stopnja biološke varnosti
1

03Identifikatorji

Navajanje vira
COLO-320 (kataloška številka Cytion 305315)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1989

04Izražanje in dovzetnost

Profil mutacij
Mutacija: TP53, p.Arg248Trp (c.742C>T)

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojilnemu mediju dodajte 10 % FBS, 2,5 g/l glukoze in 10 mM HEPES
Reagenca za disociacijo
Accutase
Gostota setve
2–4 × 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
55 let
Etnična pripadnost
Kavkaški

09Podrobnosti o izdelku

Tabela sestave