COLO-320

COLO-320 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka jelita grubego pochodząca z guza z przerzutami. Jest ona szeroko wykorzystywana w badaniach nad biologią raka jelita grubego, mechanizmami oporności na leki oraz działaniem środków przeciwnowotworowych. Komórki COLO-320 charakteryzują się nadekspresją różnych onkogenów, takich jak c-myc, o którym wiadomo, że stymuluje proliferację komórek. Linia ta stanowi również model do badania roli modyfikacji epigenetycznych w progresji nowotworu, ponieważ wykazuje częste nieprawidłowości w metylacji DNA i acetylacji histonów, które wpływają na ekspresję kluczowych genów supresorowych nowotworów oraz regulatorów cyklu komórkowego.

Badania nad linią COLO-320 wykazały, że stan metylacji promotora CDKN2A (p16) jest kluczowym czynnikiem w regulacji tego genu supresorowego nowotworów, odpowiedzialnego za hamowanie przejścia z fazy G1 do fazy S w cyklu komórkowym. Wykazano, że leczenie inhibitorami metylotransferazy DNA, takimi jak 5-aza-2’-deoksycytydyna (5-aza-dC), powoduje demetylację promotora CDKN2A, przywracając ekspresję genu i potencjalnie indukując zatrzymanie wzrostu. Ponadto inhibitory deacetylazy histonowej (HDACi), takie jak trichostatyna A (TSA), mogą modulować poziomy acetylacji histonów, wpływając na ekspresję innych genów, w tym p21WAF1. Jednak badania wykazały, że acetylacja histonów wpływa specyficznie na p21WAF1 bez znaczącego oddziaływania na histony związane z CDKN2A, co sugeruje zróżnicowaną regulację epigenetyczną.

Kolejny obszar badań skupia się na roli linii komórkowej COLO-320 w oporności wielolekowej (MDR). Linia ta została wykorzystana do oceny skuteczności różnych modulatorów MDR. Na przykład pochodne fenotiazyny wykazały zdolność do hamowania aktywności P-glikoproteiny (P-gp) – białka często nadekspresjonowanego w komórkach COLO-320, które wypompowuje leki chemioterapeutyczne, zmniejszając w ten sposób ich stężenie wewnątrzkomórkowe i skuteczność. W badaniach wykorzystano cytometrię przepływową w połączeniu z testami wypływu rodaminy 123 w celu ilościowego określenia skuteczności tych związków w odwracaniu MDR, co dostarczyło informacji na temat potencjalnych strategii przezwyciężania oporności na leki w raku jelita grubego.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym