Pāriet uz saturu
COLO-320
Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
Colo-320, Colo 320, COLO #320, COLO320, Colo320, CoLo320, Co320, COLO 320F, Colorado 320, COLO 320

Dokumenti

COLO-320

Cell line · Preces numurs 305315

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

COLO-320 ir cilvēka kolorektālās adenokarcinomas šūnu līnija, kas iegūta no metastātiska audzēja. To plaši izmanto pētījumos, lai izpētītu kolorektālā vēža bioloģiju, zāļu rezistences mehānismus un pretvēža līdzekļu iedarbību. COLO-320 šūnas raksturo dažādu onkogēnu, piemēram, c-myc, kas, kā zināms, veicina šūnu proliferāciju, pārmērīga ekspresija. Šī šūnu līnija ir arī modelis, lai pētītu epigenētisko modifikāciju lomu vēža progresēšanā, jo tajā bieži novēro DNS metilācijas un histonu acetilācijas patoloģijas, kas ietekmē galveno audzēja supresoru gēnu un šūnu cikla regulatoru ekspresiju.

Pētījumi par COLO-320 ir atklājuši, ka CDKN2A (p16) promotora metilācijas stāvoklis ir izšķirošs faktors šī audzēja supresoru gēna regulācijā, kas ir atbildīgs par G1/S fāzes pārejas inhibēšanu šūnu ciklā. Ir pierādīts, ka ārstēšana ar DNS metiltransferāzes inhibitoriem, piemēram, 5-aza-2’-dezoksicitidīnu (5-aza-dC), demetilē CDKN2A promotoru, atjaunojot gēna ekspresiju un potenciāli izraisot augšanas apturēšanu. Turklāt histonu deacetilāzes inhibitori (HDACi), piemēram, trihostatīns A (TSA), var modulēt histonu acetilācijas līmeni, ietekmējot citu gēnu, tostarp p21WAF1, ekspresiju. Tomēr pētījumi liecina, ka histonu acetilēšana specifiski ietekmē p21WAF1, būtiski neietekmējot ar CDKN2A saistītos histonus, kas liecina par diferencētu epigenētisko regulāciju.

Vēl viena pētījumu joma ir vērsta uz COLO-320 lomu daudzveidīgā zāļu rezistencē (MDR). Šo šūnu līniju ir izmantojuši, lai novērtētu dažādu MDR modulatoru efektivitāti. Piemēram, fenotiazīna atvasinājumi ir parādījuši spēju inhibēt P-glikoproteīna (P-gp) aktivitāti — proteīnu, kas COLO-320 šūnās bieži tiek pārmērīgi ekspresēts un kas izsūknē ķīmijterapijas zāles, tādējādi samazinot to intracelulāro koncentrāciju un efektivitāti. Pētījumos ir izmantota plūsmas citometrija ar rodamīna 123 izplūdes testiem, lai kvantitatīvi novērtētu šo savienojumu efektivitāti MDR neitralizēšanā, sniedzot ieskatu potenciālās stratēģijās, kā pārvarēt zāļu rezistenci kolorektālajā vēzī.

Audums
Resnās zarnas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • Colo-320
  • Colo 320
  • COLO #320
  • COLO320
  • Colo320
  • CoLo320
  • Co320
  • COLO 320F
  • Colorado 320
  • COLO 320

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
COLO-320 (Cytion kataloga numurs 305315)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1989

04Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: TP53, p.Arg248Trp (c.742C>T)

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 10 % FBS, 2,5 g/l glikozes un 10 mM HEPES
Disociācijas reaģents
Accutase
Sēšanas blīvums
2–4 × 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
55 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis

09Informācija par produktu

Sastāva tabula