COLO-320

A COLO-320 é uma linhagem celular de adenocarcinoma colorretal humano derivada de um tumor metastático. É amplamente utilizada em pesquisas para estudar a biologia do câncer colorretal, os mecanismos de resistência a medicamentos e os efeitos de agentes anticâncer. As células COLO-320 são caracterizadas pela superexpressão de vários oncogenes, como o c-myc, conhecido por estimular a proliferação celular. Essa linhagem celular também serve como modelo para investigar o papel das modificações epigenéticas na progressão do câncer, pois apresenta frequentes anormalidades na metilação do DNA e na acetilação de histonas que influenciam a expressão de genes supressores de tumor essenciais e reguladores do ciclo celular.

Pesquisas com a COLO-320 revelaram que o estado de metilação do promotor do CDKN2A (p16) é um fator crítico na regulação desse gene supressor de tumor, responsável por inibir a transição da fase G1 para a fase S no ciclo celular. O tratamento com inibidores da metiltransferase de DNA, como a 5-aza-2’-desoxicitidina (5-aza-dC), demonstrou ser capaz de desmetilar o promotor do CDKN2A, restaurando a expressão gênica e potencialmente induzindo a parada do crescimento. Além disso, inibidores de histona desacetilase (HDACis), como a tricostatina A (TSA), podem modular os níveis de acetilação das histonas, afetando a expressão de outros genes, incluindo o p21WAF1. No entanto, estudos indicaram que a acetilação de histonas influencia especificamente o p21WAF1 sem impactar significativamente as histonas associadas ao CDKN2A, sugerindo uma regulação epigenética diferencial.

Outra área de pesquisa concentra-se no papel da COLO-320 na resistência a múltiplas drogas (MDR). A linhagem celular tem sido utilizada para avaliar a eficácia de vários moduladores de MDR. Derivados da fenotiazina, por exemplo, demonstraram a capacidade de inibir a atividade da glicoproteína P (P-gp), uma proteína frequentemente superexpressa nas células COLO-320 que bombeia para fora os medicamentos quimioterápicos, reduzindo assim sua concentração intracelular e eficácia. Estudos utilizaram citometria de fluxo com ensaios de efluxo de rodamina 123 para quantificar a eficácia desses compostos na reversão da MDR, fornecendo insights sobre estratégias potenciais para superar a resistência aos medicamentos no câncer colorretal.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.