COLO-320

COLO-320, metastatik bir tümörden elde edilen bir insan kolorektal adenokarsinom hücre hattıdır. Kolorektal kanserin biyolojisi, ilaç direnci mekanizmaları ve antikanser ajanlarının etkilerini incelemek amacıyla araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. COLO-320 hücreleri, hücre çoğalmasını tetiklediği bilinen c-myc gibi çeşitli onkogenlerin aşırı ekspresyonu ile karakterize edilir. Bu hücre hattı, önemli tümör baskılayıcı genlerin ve hücre döngüsü düzenleyicilerinin ekspresyonunu etkileyen sık DNA metilasyonu ve histon asetilasyonu anormallikleri sergilediği için, kanser ilerlemesinde epigenetik modifikasyonların rolünü araştırmak için de bir modeldir.

COLO-320 üzerine yapılan araştırmalar, CDKN2A (p16) promotörünün metilasyon durumunun, hücre döngüsündeki G1/S faz geçişini inhibe etmekten sorumlu olan bu tümör baskılayıcı genin düzenlenmesinde kritik bir faktör olduğunu ortaya koymuştur. 5-aza-2’-deoksisitidin (5-aza-dC) gibi DNA metiltransferaz inhibitörleri ile tedavinin, CDKN2A promotörünün metilasyonunu kaldırdığı, gen ekspresyonunu geri kazandırdığı ve potansiyel olarak büyüme durmasını tetiklediği gösterilmiştir. Ayrıca, trikostatin A (TSA) gibi histon deasetilaz inhibitörleri (HDACi'ler), histon asetilasyon düzeylerini modüle ederek p21WAF1 dahil olmak üzere diğer genlerin ekspresyonunu etkileyebilir. Bununla birlikte, yapılan çalışmalar, histon asetilasyonunun CDKN2A ile ilişkili histonları önemli ölçüde etkilemeden özellikle p21WAF1’i etkilediğini göstermiştir; bu da farklı epigenetik düzenleme olduğunu düşündürmektedir.

Bir başka araştırma alanı ise COLO-320'nin çoklu ilaç direnci (MDR) üzerindeki rolüne odaklanmaktadır. Bu hücre hattı, çeşitli MDR modülatörlerinin etkinliğini değerlendirmek için kullanılmıştır. Örneğin, fenotiyazin türevleri, COLO-320 hücrelerinde sıklıkla aşırı eksprese edilen ve kemoterapötik ilaçları dışarı pompalayan, dolayısıyla bunların hücre içi konsantrasyonunu ve etkinliğini azaltan P-glikoprotein (P-gp) aktivitesini inhibe etme yeteneği göstermiştir. Çalışmalarda, MDR’yi tersine çevirmede bu bileşiklerin etkinliğini ölçmek için rodamin 123 efflux testleri ile akış sitometrisi kullanılmıştır; bu da kolorektal kanserde ilaç direncini aşmaya yönelik potansiyel stratejiler hakkında içgörüler sağlamıştır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın