COLO-320

COLO-320 è una linea cellulare di adenocarcinoma colorettale umano derivata da un tumore metastatico. È ampiamente utilizzata nella ricerca per studiare la biologia del cancro colorettale, i meccanismi di resistenza ai farmaci e gli effetti degli agenti antitumorali. Le cellule COLO-320 sono caratterizzate dalla sovraespressione di vari oncogeni, come il c-myc, noto per stimolare la proliferazione cellulare. Questa linea cellulare costituisce inoltre un modello per lo studio del ruolo delle modificazioni epigenetiche nella progressione del cancro, poiché presenta frequenti anomalie nella metilazione del DNA e nell’acetilazione degli istoni che influenzano l’espressione di geni oncosoppressori chiave e dei regolatori del ciclo cellulare.

La ricerca su COLO-320 ha rivelato che lo stato di metilazione del promotore di CDKN2A (p16) è un fattore critico nella regolazione di questo gene oncosoppressore, responsabile dell’inibizione della transizione dalla fase G1 alla fase S nel ciclo cellulare. È stato dimostrato che il trattamento con inibitori della metiltransferasi del DNA, come la 5-aza-2'-desossicitidina (5-aza-dC), demetila il promotore del gene CDKN2A, ripristinando l’espressione genica e potenzialmente inducendo l’arresto della crescita. Inoltre, gli inibitori delle deacetilasi istoniche (HDACi), come la tricostatina A (TSA), possono modulare i livelli di acetilazione degli istoni, influenzando l’espressione di altri geni, tra cui il p21WAF1. Tuttavia, alcuni studi hanno indicato che l’acetilazione degli istoni influenza specificamente p21WAF1 senza incidere in modo significativo sugli istoni associati a CDKN2A, suggerendo una regolazione epigenetica differenziale.

Un’altra area di ricerca si concentra sul ruolo di COLO-320 nella resistenza ai farmaci multipli (MDR). La linea cellulare è stata utilizzata per valutare l’efficacia di vari modulatori della MDR. I derivati della fenotiazina, ad esempio, hanno dimostrato la capacità di inibire l’attività della P-glicoproteina (P-gp), una proteina spesso sovraespressa nelle cellule COLO-320 che espelle i farmaci chemioterapici, riducendone così la concentrazione intracellulare e l’efficacia. Gli studi hanno utilizzato la citometria a flusso con test di efflusso della rodamina 123 per quantificare l’efficacia di questi composti nel contrastare la MDR, fornendo spunti su potenziali strategie per superare la resistenza ai farmaci nel cancro del colon-retto.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia