COLO-320

COLO-320 er en human kolorektal adenokarcinom-cellelinje, der stammer fra en metastatisk tumor. Den anvendes i vid udstrækning i forskning til at undersøge kolorektal kræftbiologi, mekanismer for lægemiddelresistens og virkningen af kræftlægemidler. COLO-320-cellerne er kendetegnet ved overekspression af forskellige onkogener, såsom c-myc, som er kendt for at fremme celleproliferation. Denne cellelinje fungerer også som model til at undersøge epigenetiske ændringers rolle i kræftprogression, da den udviser hyppige abnormiteter i DNA-methylering og histonacetylering, som påvirker ekspressionen af centrale tumorsuppressorgener og cellecyklusregulatorer.

Forskning i COLO-320 har afsløret, at methyleringsstatus for CDKN2A (p16)-promotoren er en afgørende faktor i reguleringen af dette tumorsuppressorgen, som er ansvarligt for at hæmme overgangen fra G1- til S-fasen i cellecyklussen. Behandling med DNA-metyltransferasehæmmere som 5-aza-2'-deoxycytidin (5-aza-dC) har vist sig at demethylere CDKN2A-promotoren, hvilket genopretter genekspressionen og potentielt inducerer vækststop. Desuden kan histondeacetylasehæmmere (HDAC-hæmmere) såsom trichostatin A (TSA) modulere histonacetyleringsniveauerne og dermed påvirke ekspressionen af andre gener, herunder p21WAF1. Undersøgelser har imidlertid vist, at histonacetylering specifikt påvirker p21WAF1 uden at have en signifikant indvirkning på CDKN2A-associerede histoner, hvilket tyder på differentieret epigenetisk regulering.

Et andet forskningsområde fokuserer på COLO-320's rolle i multiresistens (MDR). Cellelinjen er blevet anvendt til at evaluere effektiviteten af forskellige MDR-modulatorer. Fenothiazinderivater har for eksempel vist sig at kunne hæmme aktiviteten af P-glycoprotein (P-gp), et protein, der ofte overekspresseres i COLO-320-celler, og som pumper kemoterapeutiske lægemidler ud, hvorved deres intracellulære koncentration og effektivitet reduceres. I undersøgelserne er der anvendt flowcytometri med rhodamin 123-efflux-assays til at kvantificere disse forbindelsers effektivitet med hensyn til at modvirke MDR, hvilket giver indsigt i potentielle strategier til at overvinde lægemiddelresistens ved kolorektal cancer.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring