Mine otse sisu juurde
COLO-320
Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
Colo-320, Colo 320, COLO #320, COLO320, Colo320, CoLo320, Co320, COLO 320F, Colorado 320, COLO 320

Dokumendid

COLO-320

Cell line · Toote number 305315

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

COLO-320 on metastaatilise kasvajast saadud inimese kolorektaalse adenokartsinoomi rakuliin. Seda kasutatakse laialdaselt teadusuuringutes kolorektaalse vähi bioloogia, ravimresistentsuse mehhanismide ja vähivastaste ravimite toime uurimiseks. COLO-320 rakke iseloomustab mitmesuguste onkogeenide, näiteks c-myc, üleväljendamine, mis on tuntud rakkude proliferatsiooni soodustajana. See rakuliin on ka mudel epigeneetiliste modifikatsioonide rolli uurimiseks vähi progresseerumisel, kuna selles esineb sageli DNA metülatsiooni ja histoonide atsetüülimise kõrvalekaldeid, mis mõjutavad peamiste kasvajavastaste geenide ja rakutsükli regulaatorite ekspressiooni.

COLO-320-ga seotud uuringud on näidanud, et CDKN2A (p16) promootori metülatsiooniseisund on otsustav tegur selle kasvajavastase geeni regulatsioonis, mis vastutab rakutsükli G1/S-faasi ülemineku pärssimise eest. On näidatud, et ravi DNA-metüültransferaasi inhibiitoritega, nagu 5-aza-2’-desoksütidiin (5-aza-dC), demetüleerib CDKN2A promootorit, taastades geeni ekspressiooni ja potentsiaalselt indutseerides kasvu peatamist. Lisaks võivad histooni deatsetülaasi inhibiitorid (HDACi-d), nagu trikostatiin A (TSA), moduleerida histoonide atsetüülimise taset, mõjutades teiste geenide, sealhulgas p21WAF1, ekspressiooni. Uuringud on siiski näidanud, et histoonide atsetüülimine mõjutab spetsiifiliselt p21WAF1-i, ilma et see avaldaks märkimisväärset mõju CDKN2A-ga seotud histoonidele, mis viitab diferentseeritud epigeneetilisele regulatsioonile.

Teine uurimisvaldkond keskendub COLO-320 rollile mitmeravimresistentsuses (MDR). Seda rakuliini on kasutatud mitmesuguste MDR-modulaatorite tõhususe hindamiseks. Näiteks on fenotiasiini derivaadid näidanud võimet pärssida P-glükoproteiini (P-gp) aktiivsust – see on valk, mida COLO-320 rakkudes sageli üleväljendatakse ja mis pumpab kemoteraapiavahendeid rakust välja, vähendades seeläbi nende rakusisest kontsentratsiooni ja tõhusust. Uuringutes on kasutatud voolutsütomeetriat koos rodamiin 123 väljavoolu testidega, et kvantifitseerida nende ühendite efektiivsust MDR-i pööramisel, andes ülevaate potentsiaalsetest strateegiatest ravimresistentsuse ületamiseks kolorektaalvähi puhul.

Kude
Colon
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • Colo-320
  • Colo 320
  • COLO #320
  • COLO320
  • Colo320
  • CoLo320
  • Co320
  • COLO 320F
  • Colorado 320
  • COLO 320

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
COLO-320 (Cytioni katalooginumber 305315)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1989

04Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, p.Arg248Trp (c.742C>T)

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Lisage kasvukeskkonnale 10% FBS-i, 2,5 g/l glükoosi ja 10 mM HEPES-i
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Külvitihedus
2–4 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
55 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia

09Toote üksikasjad

Koostis tabel