01General information
- Description
A linhagem celular H22 é uma linhagem de carcinoma hepatocelular murino derivada de células tumorais do fígado. Essas células são comumente utilizadas em pesquisas sobre o câncer para estudar os mecanismos do câncer de fígado, intervenções terapêuticas e a eficácia de medicamentos. As células H22 apresentam características típicas do carcinoma hepatocelular, incluindo rápida proliferação, resistência à apoptose e a capacidade de formar tumores quando injetadas em modelos animais adequados. Isso as torna uma ferramenta valiosa para estudos in vivo que visam compreender o crescimento tumoral, a metástase e o microambiente tumoral no câncer de fígado.
Uma das vantagens significativas da linhagem celular H22 é seu uso na pesquisa em imunoterapia. Como as células são derivadas de um modelo murino, elas são particularmente úteis para estudar as interações entre as células cancerosas e o sistema imunológico em um ambiente controlado. Pesquisadores utilizam as células H22 para avaliar a eficácia de vários agentes imunoterapêuticos, incluindo inibidores de pontos de controle e vacinas contra o câncer. Além disso, as células H22 são empregadas na investigação de vias metabólicas específicas do fígado e do papel das mutações genéticas na progressão do carcinoma hepatocelular.
De modo geral, a linhagem celular H22 serve como um modelo robusto para o carcinoma hepatocelular, proporcionando insights sobre a biologia do câncer e auxiliando no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. Sua relevância tanto para estudos in vitro quanto in vivo ressalta sua importância no campo da pesquisa sobre o câncer.
- Tissue
- Fígado
- Disease
- Carcinoma hepatocelular
- Synonyms
- Hepatoma-22
- Hepatoma 22
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Linfoblasto
04Identifiers
- Citation
- H22 (número de catálogo da Cytion 305163)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_H613
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Subculturing
- Homogeneíze suavemente a suspensão celular no frasco por meio de pipetagem para cima e para baixo e, em seguida, colete uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão com meio de cultura fresco até atingir uma concentração celular de 1 x 10⁵ células/ml e distribua a suspensão ajustada em alíquotas em novos frascos para continuação do cultivo.
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
07Donor
- Breed / subspecies
- C3HA
08Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
