الانتقال إلى المحتوى
C33A
الأنسجة
عنق الرحم
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية في عنق الرحم الحرشفية
المرادفات
C33A, C33a, C33-A, C-33-A, C-33A, C33

المستندات

C33A

Cell line · رقم المنتج 305072

C-33 A cells originate from the cervical tissue of a 66-year-old Caucasian female diagnosed with uterine cancer. This cell line is characterized by a uniq...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تنشأ خلايا C-33 A من نسيج عنق الرحم لأنثى قوقازية تبلغ من العمر 66 عاماً تم تشخيص إصابتها بسرطان الرحم. ويتميز هذا الخط الخلوي بتغير جيني فريد من نوعه في جين TP53، حيث تؤدي طفرة نقطية عند الكودون 273 إلى استبدال الأرجينين إلى السيستين، مما يؤدي إلى ارتفاع التعبير عن بروتين p53. وتؤدي هذه الطفرة دورًا حاسمًا في الفيزيولوجيا المرضية للخلايا، وتؤثر على خصائص نموها وقدرتها على التسبب في الإصابة بالأورام.

والجدير بالذكر أن خلايا C-33 A ثبت أنها خلايا مولدة للأورام. عند إدخال هذه الخلايا في فئران عارية تعاني من نقص المناعة، فإن هذه الخلايا لديها القدرة على تكوين أورام سرطانية غير متمايزة، مما يسلط الضوء على فائدتها في أبحاث السرطان، خاصة في الدراسات التي تهدف إلى فهم آليات بدء الورم وتطوره في سرطان عنق الرحم. وعلاوة على ذلك، فإن هذه الخلايا سلبية لكل من الحمض النووي والحمض النووي الريبوزي لفيروس الورم الحليمي البشري (HPV)، مما يميزها عن العديد من خطوط خلايا سرطان عنق الرحم الأخرى التي غالباً ما تحمل تكامل فيروس الورم الحليمي البشري. ويجعل هذا الجانب خلايا C-33 A ذات قيمة خاصة لدراسة سرطان عنق الرحم الذي يتطور بشكل مستقل عن عدوى فيروس الورم الحليمي البشري، مما يوفر نظرة ثاقبة للمسارات البديلة لتكوين السرطان.

الأنسجة
عنق الرحم
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية في عنق الرحم الحرشفية
المرادفات
  • C33A
  • C33a
  • C33-A
  • C-33-A
  • C-33A
  • C33

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم

04المعرّفات

المرجع
C33A (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305072)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1094

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
جينات الأورام: P53+، P53+، Prb+

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
66 سنة