Skip to content
C33A
Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งเซลล์สความัสของปากมดลูก
Synonyms
C33A, C33a, C33-A, C-33-A, C-33A, C33

Documents

C33A

Cell line · Product number 305072

C-33 A cells originate from the cervical tissue of a 66-year-old Caucasian female diagnosed with uterine cancer. This cell line is characterized by a uniq...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ C-33 A มีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อปากมดลูกของหญิงชาวคอเคเชียนอายุ 66 ปีที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นมะเร็งมดลูก สายเซลล์นี้มีลักษณะเฉพาะจากการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมในยีน TP53 ซึ่งเกิดการกลายพันธุ์แบบจุดที่โคดอน 273 ส่งผลให้เกิดการแทนที่กรดอะมิโนอาร์จินีนด้วยซิสเทอีน ทำให้มีการแสดงออกของโปรตีน p53 เพิ่มสูงขึ้นการกลายพันธุ์นี้มีบทบาทสำคัญในพยาธิสรีรวิทยาของเซลล์ โดยส่งผลต่อคุณสมบัติการเจริญเติบโตและศักยภาพในการก่อให้เกิดเนื้องอก

ที่น่าสังเกตคือ เซลล์ C-33 A ได้รับการยืนยันแล้วว่าสามารถก่อให้เกิดเนื้องอกได้ เมื่อถูกนำเข้าสู่หนูที่ไม่มีระบบภูมิคุ้มกัน (nude mice) เซลล์เหล่านี้มีความสามารถในการก่อให้เกิดมะเร็งชนิดไม่แยกตัว (undifferentiated carcinomas) ซึ่งชี้ให้เห็นถึงประโยชน์ของเซลล์เหล่านี้ในการวิจัยโรคมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาที่มุ่งเข้าใจกลไกการเริ่มต้นและการลุกลามของมะเร็งปากมดลูกนอกจากนี้ เซลล์เหล่านี้ยังแสดงผลลบต่อทั้ง DNA และ RNA ของเชื้อไวรัสฮิวแมนแพปพิลโลมา (HPV) ซึ่งแตกต่างจากเซลล์มะเร็งปากมดลูกหลายสายพันธุ์ที่มักมีการรวมตัวของ HPV อยู่ในดีเอ็นเอ การมีลักษณะเช่นนี้ทำให้เซลล์ C-33 A มีคุณค่าอย่างยิ่งในการศึกษาโรคมะเร็งปากมดลูกที่พัฒนาขึ้นโดยไม่เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อ HPV ซึ่งช่วยให้เข้าใจกลไกการเกิดมะเร็งในเส้นทางอื่น ๆ ได้

Tissue
ปากมดลูก
Disease
มะเร็งเซลล์สความัสของปากมดลูก
Synonyms
  • C33A
  • C33a
  • C33-A
  • C-33-A
  • C-33A
  • C33

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่

04Identifiers

Citation
C33A (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305072)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1094

05Expression and susceptibility

Protein expression
ยีนก่อมะเร็ง: P53+, Prb+

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
66 ปี