Mine otse sisu juurde
C33A
Kude
Emakakael
Haigus
Emakakaela emakakaela karsinoom
Sünonüümid
C33A, C33a, C33-A, C-33-A, C-33A, C33

Dokumendid

C33A

Cell line · Toote number 305072

C-33 A cells originate from the cervical tissue of a 66-year-old Caucasian female diagnosed with uterine cancer. This cell line is characterized by a uniq...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

C-33 A rakud pärinevad emakakaelavähi diagnoosiga 66-aastase kaukaasia naise emakakaelavähist. Seda rakuliini iseloomustab ainulaadne geneetiline muutus TP53 geenis, kus punktmutatsioon koodonis 273 põhjustab arginiini asendamist tsüsteiiniga, mis viib p53 valgu suurenenud ekspressiooni. See mutatsioon mängib rakkude patofüsioloogias kriitilist rolli, mõjutades nende kasvuomadusi ja kasvupotentsiaali.

Nimelt on C-33 A rakud kinnitust leidnud, et nad on tumorigeensed. Kui need rakud viiakse immuunpuudulikesse alasti hiirtesse, on neil võime moodustada diferentseerimata kartsinoome, mis rõhutab nende kasulikkust vähiuuringutes, eelkõige uuringutes, mille eesmärk on mõista emakakaelavähi kasvajate tekke- ja progresseerumismehhanisme. Lisaks on need rakud negatiivsed nii inimese papilloomiviiruse (HPV) DNA kui ka RNA suhtes, mis eristab neid paljudest teistest emakakaelavähi rakuliinidest, mis sageli kannavad HPV integratsiooni. See aspekt muudab C-33 A rakud eriti väärtuslikuks HPV-infektsioonist sõltumatult areneva emakakaelavähi uurimiseks, andes ülevaate alternatiivsetest kantserogeneesi radadest.

Kude
Emakakael
Haigus
Emakakaela emakakaela karsinoom
Sünonüümid
  • C33A
  • C33a
  • C33-A
  • C-33-A
  • C-33A
  • C33

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
C33A (Cytioni katalooginumber 305072)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1094

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Onkogeenid: P53+, Prb+

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
66 aastat