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C33A
Pañuelo de papel
Cérvix
Enfermedad
Carcinoma de células escamosas del cuello uterino
Sinónimos
C33A, C33a, C33-A, C-33-A, C-33A, C33

Documentos

C33A

Cell line · Número de producto 305072

C-33 A cells originate from the cervical tissue of a 66-year-old Caucasian female diagnosed with uterine cancer. This cell line is characterized by a uniq...

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Recomendado (lote más fresco)
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1

01Información general

Descripción

Las células C-33 A proceden del tejido cervical de una mujer caucásica de 66 años diagnosticada de cáncer de útero. Esta línea celular se caracteriza por una alteración genética única en el gen TP53, donde una mutación puntual en el codón 273 da lugar a una sustitución de arginina por cisteína, lo que conduce a una expresión elevada de la proteína p53. Esta mutación desempeña un papel crítico en la fisiopatología de las células, influyendo en sus propiedades de crecimiento y en su potencial tumorigénico.

En particular, se ha confirmado que las células C-33 A son tumorigénicas. Cuando se introducen en ratones desnudos inmunodeficientes, estas células tienen la capacidad de formar carcinomas indiferenciados, lo que pone de relieve su utilidad en la investigación del cáncer, especialmente en estudios dirigidos a comprender los mecanismos de iniciación y progresión tumoral en el cáncer de cuello de útero. Además, estas células son negativas tanto para el ADN como para el ARN del virus del papiloma humano (VPH), lo que las distingue de muchas otras líneas celulares de cáncer de cuello de útero que a menudo portan integraciones del VPH. Este aspecto hace que las células C-33 A sean especialmente valiosas para estudiar el cáncer de cuello de útero que se desarrolla independientemente de la infección por el VPH, lo que permite conocer vías alternativas de carcinogénesis.

Pañuelo de papel
Cérvix
Enfermedad
Carcinoma de células escamosas del cuello uterino
Sinónimos
  • C33A
  • C33a
  • C33-A
  • C-33-A
  • C-33A
  • C33

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial
Tumorigénico
Sí

04Identificadores

Referencia
C33A (número de catálogo de Cytion 305072)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1094

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Oncogenes: P53+, Prb+

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
66 años