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C33A
Tecido
Colo do útero
Doença
Carcinoma de células escamosas do colo do útero
Sinónimos
C33A, C33a, C33-A, C-33-A, C-33A, C33

Documentos

C33A

Cell line · Número do produto 305072

C-33 A cells originate from the cervical tissue of a 66-year-old Caucasian female diagnosed with uterine cancer. This cell line is characterized by a uniq...

€550.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição

As células C-33 A têm origem no tecido cervical de uma mulher caucasiana de 66 anos a quem foi diagnosticado cancro do útero. Esta linha celular é caracterizada por uma alteração genética única no gene TP53, em que uma mutação pontual no códão 273 resulta numa substituição de arginina por cisteína, levando a uma expressão elevada da proteína p53. Esta mutação desempenha um papel crítico na fisiopatologia das células, influenciando as suas propriedades de crescimento e o seu potencial tumorigénico.

Nomeadamente, confirmou-se que as células C-33 A são tumorigénicas. Quando introduzidas em ratinhos nus imunodeficientes, estas células têm a capacidade de formar carcinomas indiferenciados, o que realça a sua utilidade na investigação do cancro, particularmente em estudos destinados a compreender os mecanismos de iniciação e progressão do tumor no cancro do colo do útero. Além disso, estas células são negativas tanto para o ADN como para o ARN do papilomavírus humano (HPV), o que as distingue de muitas outras linhas celulares de cancro do colo do útero que frequentemente transportam integrações do HPV. Este aspeto torna as células C-33 A particularmente valiosas para o estudo do cancro do colo do útero que se desenvolve independentemente da infeção pelo HPV, oferecendo conhecimentos sobre vias alternativas de carcinogénese.

Tecido
Colo do útero
Doença
Carcinoma de células escamosas do colo do útero
Sinónimos
  • C33A
  • C33a
  • C33-A
  • C-33-A
  • C-33A
  • C33

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Sim

04Identificadores

Referência
C33A (número de catálogo Cytion 305072)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1094

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Oncogenes: P53+, Prb+

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
66 anos