Ga naar de inhoud
C33A
Weefsel
Baarmoederhals
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom van de baarmoederhals uteri
Synoniemen
C33A, C33a, C33-A, C-33-A, C-33A, C33

Documenten

C33A

Cell line · Productnummer 305072

C-33 A cells originate from the cervical tissue of a 66-year-old Caucasian female diagnosed with uterine cancer. This cell line is characterized by a uniq...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

C-33 A-cellen zijn afkomstig uit het baarmoederhalsweefsel van een 66-jarige Kaukasische vrouw bij wie baarmoederkanker was vastgesteld. Deze cellijn wordt gekenmerkt door een unieke genetische verandering in het TP53-gen, waarbij een puntmutatie op codon 273 resulteert in een vervanging van arginine door cysteïne, wat leidt tot een verhoogde expressie van het p53-eiwit. Deze mutatie speelt een cruciale rol in de pathofysiologie van de cellen en beïnvloedt hun groei-eigenschappen en tumorigene potentieel.

Met name is bevestigd dat C-33 A-cellen tumorigene cellen zijn. Bij introductie in immunodeficiënte naaktmuizen kunnen deze cellen ongedifferentieerde carcinomen vormen, wat hun nut voor kankeronderzoek benadrukt, met name in studies die gericht zijn op het begrijpen van de mechanismen van tumorinitiatie en -progressie bij baarmoederhalskanker. Bovendien zijn deze cellen negatief voor zowel DNA als RNA van humaan papillomavirus (HPV), waardoor ze zich onderscheiden van veel andere baarmoederhalskankercellijnen die vaak HPV-integraties dragen. Dit aspect maakt C-33 A-cellen bijzonder waardevol voor het bestuderen van baarmoederhalskanker die zich onafhankelijk van HPV-infectie ontwikkelt en biedt inzicht in alternatieve routes van carcinogenese.

Weefsel
Baarmoederhals
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom van de baarmoederhals uteri
Synoniemen
  • C33A
  • C33a
  • C33-A
  • C-33-A
  • C-33A
  • C33

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Tumorverwekkend
Ja

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
C33A (Cytion catalogusnummer 305072)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1094

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Oncogenen: P53+, Prb+

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
66 jaar