Preskoči na vsebino
C33A
Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Ploščatocelični karcinom materničnega vratu
Sinonimi
C33A, C33a, C33-A, C-33-A, C-33A, C33

Dokumenti

C33A

Cell line · Številka izdelka 305072

C-33 A cells originate from the cervical tissue of a 66-year-old Caucasian female diagnosed with uterine cancer. This cell line is characterized by a uniq...

€550.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice C-33 A izvirajo iz tkiva materničnega vratu 66-letne belopolte ženske z diagnozo raka maternice. Za to celično linijo je značilna edinstvena genetska sprememba v genu TP53, pri kateri točkovna mutacija na kodonu 273 povzroči zamenjavo arginina s cisteinom, zaradi česar se poveča izražanje beljakovine p53. Ta mutacija ima ključno vlogo v patofiziologiji celic, saj vpliva na njihove rastne lastnosti in tumorski potencial.

Zlasti je potrjeno, da so celice C-33 A tumorogene. Ko jih vnesemo v imunodeficientne gole miši, so te celice sposobne tvoriti nediferencirane karcinome, kar poudarja njihovo uporabnost pri raziskavah raka, zlasti v študijah, katerih cilj je razumeti mehanizme nastanka in napredovanja tumorjev pri raku materničnega vratu. Poleg tega so te celice negativne na DNK in RNK človeškega papiloma virusa (HPV), kar jih razlikuje od številnih drugih celičnih linij raka materničnega vratu, ki pogosto vsebujejo integracije HPV. Zaradi tega vidika so celice C-33 A še posebej dragocene za preučevanje raka materničnega vratu, ki se razvije neodvisno od okužbe s HPV, kar omogoča vpogled v alternativne poti kancerogeneze.

Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Ploščatocelični karcinom materničnega vratu
Sinonimi
  • C33A
  • C33a
  • C33-A
  • C-33-A
  • C-33A
  • C33

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Tumorigeničen
Da

04Identifikatorji

Navajanje vira
C33A (kataloška številka Cytion 305072)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1094

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Onkogeni: P53+, Prb+

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
66 let