Pāriet uz saturu
C33A
Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Dzemdes dzemdes kakla plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
C33A, C33a, C33-A, C-33-A, C-33A, C33

Dokumenti

C33A

Cell line · Preces numurs 305072

C-33 A cells originate from the cervical tissue of a 66-year-old Caucasian female diagnosed with uterine cancer. This cell line is characterized by a uniq...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

C-33 A šūnas nāk no 66 gadus vecas baltādainas sievietes dzemdes kakla audiem, kurai diagnosticēts dzemdes vēzis. Šai šūnu līnijai ir raksturīga unikāla TP53 gēna ģenētiska izmaiņa, kur punktveida mutācija 273. kodonā izraisa arginīna aizstāšanu ar cisteīnu, kā rezultātā paaugstinās p53 proteīna ekspresija. Šai mutācijai ir izšķiroša nozīme šūnu patofizioloģijā, ietekmējot to augšanas īpašības un audzēja potenciālu.

Ir apstiprināts, ka C-33 A šūnas ir tumorogēnas. Ievietojot šīs šūnas imūndeficītajās nude pelēs, tās spēj veidot nediferencētus karcinomus, kas uzsver to lietderību vēža pētījumos, jo īpaši pētījumos, kuru mērķis ir izprast dzemdes kakla vēža audzēju iniciācijas un progresēšanas mehānismus. Turklāt šīs šūnas ir negatīvas gan attiecībā uz cilvēka papilomas vīrusa (HPV) DNS, gan RNS, kas tās atšķir no daudzām citām dzemdes kakla vēža šūnu līnijām, kurās bieži ir HPV integrācijas. Šis aspekts padara C-33 A šūnas īpaši vērtīgas, lai pētītu dzemdes kakla vēzi, kas attīstās neatkarīgi no HPV infekcijas, sniedzot ieskatu alternatīvos kanceroģenēzes ceļos.

Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Dzemdes dzemdes kakla plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
  • C33A
  • C33a
  • C33-A
  • C-33-A
  • C-33A
  • C33

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
C33A (Cytion kataloga numurs 305072)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1094

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Onkogēni: P53+, Prb+

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
66 gadi