Tartalomra ugrás
C33A
Szövet
Cervix
Betegség
A méhnyak laphámsejtes karcinómája
Szinonimák
C33A, C33a, C33-A, C-33-A, C-33A, C33

Dokumentumok

C33A

Cell line · Termékszám 305072

C-33 A cells originate from the cervical tissue of a 66-year-old Caucasian female diagnosed with uterine cancer. This cell line is characterized by a uniq...

€550.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A C-33 A sejtek egy 66 éves kaukázusi nő méhnyakrákkal diagnosztizált méhnyakszövetéből származnak. Ezt a sejtvonalat a TP53 gén egyedi genetikai változása jellemzi, ahol egy pontmutáció a 273-as kodonnál arginin-cisztein helyettesítést eredményez, ami a p53 fehérje fokozott expressziójához vezet. Ez a mutáció kritikus szerepet játszik a sejtek patofiziológiájában, befolyásolva azok növekedési tulajdonságait és tumorogén potenciálját.

Különösen a C-33 A sejtek bizonyítottan tumorgenikusak. Immunhiányos meztelen egerekbe juttatva ezek a sejtek képesek differenciálatlan karcinómák kialakítására, ami kiemeli hasznosságukat a rákkutatásban, különösen a méhnyakrák tumorindulási és progressziós mechanizmusainak megértését célzó vizsgálatokban. Továbbá ezek a sejtek negatívak mind a humán papillomavírus (HPV) DNS-ére, mind RNS-ére, ami megkülönbözteti őket számos más méhnyakrákos sejtvonaltól, amelyek gyakran hordoznak HPV-integrációt. Ez a szempont a C-33 A sejteket különösen értékessé teszi a HPV-fertőzéstől függetlenül kialakuló méhnyakrák tanulmányozására, betekintést nyújtva a karcinogenezis alternatív útvonalaiba.

Szövet
Cervix
Betegség
A méhnyak laphámsejtes karcinómája
Szinonimák
  • C33A
  • C33a
  • C33-A
  • C-33-A
  • C-33A
  • C33

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Daganatképző
Igen

04Azonosítók

Hivatkozás
C33A (Cytion katalógusszám: 305072)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1094

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Onkogének: P53+, Prb+

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
66 év