الانتقال إلى المحتوى
خلايا HCT-15
الأنسجة
القولون والمستقيم
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
HCT 15, HCT.15, HCT15

المستندات

خلايا HCT-15

Cell line · رقم المنتج 300229

تستمد خلايا HCT-15 من ورم غدي سرطاني في القولون لرجل قوقازي يبلغ من العمر 44 عامًا. ويُستخدم هذا السلالة الخلوية، التي تم تطويرها في أوائل السبعينيات، على نطاق واسع...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تُشتق خلايا HCT-15 من سرطان القولون الغدي لذكر قوقازي يبلغ من العمر 44 عاماً. يُستخدم هذا الخط الخلوي، الذي تم تطويره في أوائل السبعينيات، على نطاق واسع في مجال أبحاث السرطان، وخاصةً لاستكشاف بيولوجيا وعلاج سرطان القولون والمستقيم.

من الناحية الشكلية، تتميز خلايا HCT-15 بمظهر شبيه بالظهارة مع ميلها للنمو كطبقة واحدة وفي عناقيد على حد سواء، مما يُظهر عدم تجانس خلوي كبير. وتعكس هذه الميزة البيئات الخلوية المتنوعة الموجودة في الأورام الصلبة، مما يجعل HCT-15 نموذجاً قيماً لدراسة ديناميكيات الورم والتفاعلات الخلوية داخل البيئة الدقيقة للورم.

ومن الناحية الجينية، تُظهر خلايا HCT-15 نمطاً وراثياً مفرط الازدواج الصبغي مع انحرافات كروموسومية متعددة، وهو ما يميز العديد من سرطانات القولون والمستقيم. وتشمل هذه الطفرات طفرات في الجينات الرئيسية المسببة للأورام والجينات الكابتة للأورام، مثل الطفرات في جين KRAS وحذف الجينات التي تؤثر على مسار p53، والتي لها دور في التسبب في الإصابة بسرطان القولون والمستقيم وتطوره. تجعل هذه السمات الوراثية من خلايا HCT-15 أداة حاسمة لدراسة الآليات الوراثية والجزيئية المرتبطة بتطور السرطان والورم الخبيث ومقاومة العلاجات.

وقد أدى الاستخدام الواسع النطاق لخلايا HCT-15 في الأبحاث إلى رؤى مهمة في المسارات الجزيئية المرتبطة بسرطان القولون والمستقيم، مما يعزز فهمنا لآليات المرض ويساعد في تطوير علاجات مستهدفة.

الأنسجة
القولون والمستقيم
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
  • HCT 15
  • HCT.15
  • HCT15

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
في الفئران العارية
زمن المضاعفة
15 ساعة

04المعرّفات

المرجع
HCT-15 (كتالوج سيتيون رقم 300229)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0292

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
تكون الخلايا موجبة للكيراتين عن طريق تلوين الكيراتين بواسطة الأكسيداز المناعي.
الفيروسات
إنزيم النسخ العكسي سالب

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 إلى 2 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
سريع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
67 سنة