
- Tissue
- ลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
- Disease
- อะดีโนคาร์ซิโนมา
- Synonyms
- HCT 15, HCT.15, HCT15
Documents
เซลล์ HCT-15
Cell line · Product number 300229
HCT-15 cells are derived from the adenocarcinoma of the colon of a 44-year-old Caucasian male. This cell line, developed in the early 1970s, is widely uti...
Customization / Recommendations
- เซลล์ HCT-15Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ HCT-15 มีต้นกำเนิดจากอะดีโนคาร์ซิโนมาของลำไส้ใหญ่ในชายชาวคอเคเชียนอายุ 44 ปี สายเซลล์นี้ถูกพัฒนาขึ้นในช่วงต้นทศวรรษ 1970 และถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในด้านการวิจัยมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาชีววิทยาและการรักษาโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
ในเชิงสัณฐานวิทยา เซลล์ HCT-15 มีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว โดยมีการเจริญเติบโตทั้งแบบชั้นเดียวและแบบกลุ่ม พร้อมทั้งแสดงความหลากหลายของเซลล์อย่างมีนัยสำคัญ ลักษณะนี้สะท้อนถึงสภาพแวดล้อมของเซลล์ที่หลากหลายในเนื้องอกชนิดแข็ง ทำให้ HCT-15 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาพลวัตของเนื้องอกและปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์ภายในจุลภาคแวดล้อมของเนื้องอก
ในเชิงพันธุกรรม, เซลล์ HCT-15 แสดงลักษณะโครโมโซมแบบไฮเปอร์ไดพลอยด์พร้อมความผิดปกติของโครโมโซมหลายตำแหน่ง ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักหลายชนิดซึ่งรวมถึงการกลายพันธุ์ในยีนก่อมะเร็งและยีนกดการเจริญเติบโตของเนื้องอกที่สำคัญ เช่น การกลายพันธุ์ในยีน KRAS และการลบที่ส่งผลต่อเส้นทาง p53 ซึ่งมีส่วนเกี่ยวข้องในการเกิดโรคและพัฒนาการของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก ลักษณะทางพันธุกรรมเหล่านี้ทำให้เซลล์ HCT-15 เป็นเครื่องมือสำคัญในการศึกษาวิถีทางพันธุกรรมและโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาของมะเร็ง การแพร่กระจาย และความต้านทานต่อการรักษา
การใช้เซลล์ HCT-15 อย่างกว้างขวางในงานวิจัยได้นำไปสู่ความเข้าใจเชิงลึกเกี่ยวกับเส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก ซึ่งช่วยเสริมสร้างความเข้าใจในกลไกของโรคและสนับสนุนการพัฒนาวิธีการรักษาที่มุ่งเป้าเฉพาะ
- Tissue
- ลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
- Disease
- อะดีโนคาร์ซิโนมา
- Synonyms
- HCT 15
- HCT.15
- HCT15
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
- Tumourigenic
- ในหนูที่ไม่มีขน
- Doubling time
- 15 ชั่วโมง
04Identifiers
- Citation
- HCT-15 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300229)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0292
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- เซลล์มีผลบวกต่อเคราตินโดยการย้อมด้วยวิธีอิมมูโนเปอร์ออกซิเดส
- Viruses
- ผลลบต่อเอนไซม์ย้อนกลับทรานสคริปเทส
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Seeding density
- 1 ถึง 2 x 104 เซลล์/ตารางเซนติเมตร
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Post-thaw recovery
- รวดเร็ว
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- 67 ปี
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes