Skip to content
เซลล์ HCT-15
Tissue
ลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
HCT 15, HCT.15, HCT15

Documents

เซลล์ HCT-15

Cell line · Product number 300229

HCT-15 cells are derived from the adenocarcinoma of the colon of a 44-year-old Caucasian male. This cell line, developed in the early 1970s, is widely uti...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ HCT-15 มีต้นกำเนิดจากอะดีโนคาร์ซิโนมาของลำไส้ใหญ่ในชายชาวคอเคเชียนอายุ 44 ปี สายเซลล์นี้ถูกพัฒนาขึ้นในช่วงต้นทศวรรษ 1970 และถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในด้านการวิจัยมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาชีววิทยาและการรักษาโรคมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก

ในเชิงสัณฐานวิทยา เซลล์ HCT-15 มีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว โดยมีการเจริญเติบโตทั้งแบบชั้นเดียวและแบบกลุ่ม พร้อมทั้งแสดงความหลากหลายของเซลล์อย่างมีนัยสำคัญ ลักษณะนี้สะท้อนถึงสภาพแวดล้อมของเซลล์ที่หลากหลายในเนื้องอกชนิดแข็ง ทำให้ HCT-15 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาพลวัตของเนื้องอกและปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์ภายในจุลภาคแวดล้อมของเนื้องอก

ในเชิงพันธุกรรม, เซลล์ HCT-15 แสดงลักษณะโครโมโซมแบบไฮเปอร์ไดพลอยด์พร้อมความผิดปกติของโครโมโซมหลายตำแหน่ง ซึ่งเป็นลักษณะทั่วไปของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักหลายชนิดซึ่งรวมถึงการกลายพันธุ์ในยีนก่อมะเร็งและยีนกดการเจริญเติบโตของเนื้องอกที่สำคัญ เช่น การกลายพันธุ์ในยีน KRAS และการลบที่ส่งผลต่อเส้นทาง p53 ซึ่งมีส่วนเกี่ยวข้องในการเกิดโรคและพัฒนาการของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก ลักษณะทางพันธุกรรมเหล่านี้ทำให้เซลล์ HCT-15 เป็นเครื่องมือสำคัญในการศึกษาวิถีทางพันธุกรรมและโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาของมะเร็ง การแพร่กระจาย และความต้านทานต่อการรักษา

การใช้เซลล์ HCT-15 อย่างกว้างขวางในงานวิจัยได้นำไปสู่ความเข้าใจเชิงลึกเกี่ยวกับเส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก ซึ่งช่วยเสริมสร้างความเข้าใจในกลไกของโรคและสนับสนุนการพัฒนาวิธีการรักษาที่มุ่งเป้าเฉพาะ

Tissue
ลำไส้ใหญ่และทวารหนัก
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • HCT 15
  • HCT.15
  • HCT15

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ในหนูที่ไม่มีขน
Doubling time
15 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HCT-15 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300229)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0292

05Expression and susceptibility

Antigen expression
เซลล์มีผลบวกต่อเคราตินโดยการย้อมด้วยวิธีอิมมูโนเปอร์ออกซิเดส
Viruses
ผลลบต่อเอนไซม์ย้อนกลับทรานสคริปเทส

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 ถึง 2 x 104 เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
รวดเร็ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
67 ปี