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Células HCT-15
Tissue
Colorretal
Disease
Adenocarcinoma
Synonyms
HCT 15, HCT.15, HCT15

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Células HCT-15

Cell line · Product number 300229

HCT-15 cells are derived from the adenocarcinoma of the colon of a 44-year-old Caucasian male. This cell line, developed in the early 1970s, is widely uti...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

As células HCT-15 são derivadas do adenocarcinoma do cólon de um homem caucasiano de 44 anos. Essa linhagem celular, desenvolvida no início da década de 1970, é amplamente utilizada no campo da pesquisa sobre o câncer, especialmente para o estudo da biologia e do tratamento do câncer colorretal.

Morfologicamente, as células HCT-15 são caracterizadas por uma aparência semelhante à epitelial, com tendência a crescer tanto em monocamada quanto em aglomerados, apresentando significativa heterogeneidade celular. Essa característica reflete os diversos ambientes celulares encontrados em tumores sólidos, tornando as células HCT-15 um modelo valioso para o estudo da dinâmica tumoral e das interações celulares no microambiente tumoral.

Genotipicamente, as células HCT-15 apresentam um cariótipo hiperdiplóide com múltiplas aberrações cromossômicas, típicas de muitos cânceres colorretais. Isso inclui mutações em oncogenes-chave e genes supressores de tumor, como mutações no gene KRAS e deleções que afetam a via do p53, as quais estão implicadas na patogênese e na progressão do câncer colorretal. Essas características genéticas tornam as células HCT-15 uma ferramenta crucial para investigar mecanismos genéticos e moleculares associados à progressão do câncer, à metástase e à resistência às terapias.

O amplo uso das células HCT-15 na pesquisa levou a descobertas significativas sobre as vias moleculares envolvidas no câncer colorretal, aprimorando nossa compreensão dos mecanismos da doença e auxiliando no desenvolvimento de terapias direcionadas.

Tissue
Colorretal
Disease
Adenocarcinoma
Synonyms
  • HCT 15
  • HCT.15
  • HCT15

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Tumourigenic
Em camundongos nude
Doubling time
15 horas

04Identifiers

Citation
HCT-15 (número de catálogo da Cytion 300229)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0292

05Expression and susceptibility

Antigen expression
As células apresentam resultado positivo para queratina na coloração por imunoperoxidase.
Viruses
Negativo para a transcriptase reversa

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, com 2,0 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion: 820700a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 a 2 x 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Rápido
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
67 anos