Gå direkte til indholdet
HCT-15-celler
Væv
Kolorektal
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
HCT 15, HCT.15, HCT15

Dokumenter

HCT-15-celler

Cell line · Varenummer 300229

HCT-15-celler stammer fra et adenokarcinom i tyktarmen hos en 44-årig kaukasisk mand. Denne cellelinje, der blev udviklet i begyndelsen af 1970’erne, anvendes i vid udstrækning...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HCT-15-celler stammer fra et adenokarcinom i tyktarmen hos en 44-årig kaukasisk mand. Denne cellelinje, der blev udviklet i begyndelsen af 1970'erne, bruges i vid udstrækning inden for kræftforskning, især til at udforske biologien og behandlingen af kolorektal cancer.

Morfologisk set er HCT-15-celler kendetegnet ved et epitellignende udseende med en tendens til at vokse både som et monolag og i klynger, hvilket viser en betydelig cellulær heterogenitet. Denne funktion afspejler de varierede cellulære miljøer, der findes i solide tumorer, hvilket gør HCT-15 til en værdifuld model til undersøgelse af tumordynamik og cellulære interaktioner i tumormikromiljøet.

Genotypisk udviser HCT-15-celler en hyperdiploid karyotype med flere kromosomafvigelser, der er typiske for mange kolorektale kræftformer. Disse omfatter mutationer i vigtige onkogener og tumorundertrykkende gener, såsom mutationer i KRAS-genet og deletioner, der påvirker p53-vejen, som er involveret i patogenesen og progressionen af kolorektal cancer. Disse genetiske træk gør HCT-15-celler til et afgørende værktøj til at undersøge genetiske og molekylære mekanismer, der er forbundet med kræftprogression, metastase og resistens over for behandlinger.

Den brede anvendelse af HCT-15-celler i forskning har ført til betydelig indsigt i de molekylære veje, der er involveret i kolorektal cancer, hvilket forbedrer vores forståelse af sygdomsmekanismer og hjælper med at udvikle målrettede terapier.

Væv
Kolorektal
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
  • HCT 15
  • HCT.15
  • HCT15

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
I nøgne mus
Fordoblingstid
15 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HCT-15 (Cytion katalognummer 300229)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0292

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
Cellerne er positive for keratin ved immunoperoxidasefarvning.
Vira
Omvendt transkriptase negativ

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 til 2 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Hurtig
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
67 år