Перейти до вмісту
Клітини HCT-15
Тканина
Колоректальний
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
HCT 15, HCT.15, HCT15

Документи

Клітини HCT-15

Cell line · Номер товару 300229

Клітини HCT-15 походять з аденокарциноми товстої кишки 44-річного чоловіка європейської раси. Ця клітинна лінія, створена на початку 1970-х років, широко використовується...

€430.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини HCT-15 отримані з аденокарциноми товстої кишки 44-річного чоловіка європеоїдної раси. Ця клітинна лінія, розроблена на початку 1970-х років, широко використовується в галузі дослідження раку, особливо для вивчення біології та лікування колоректального раку.

Морфологічно клітини HCT-15 характеризуються епітеліоподібним виглядом з тенденцією до росту як у вигляді моношару, так і в кластерах, демонструючи значну клітинну гетерогенність. Ця особливість відображає різноманітні клітинні середовища, що зустрічаються в солідних пухлинах, що робить HCT-15 цінною моделлю для вивчення динаміки пухлини і клітинних взаємодій в пухлинному мікрооточенні.

Генотипічно клітини HCT-15 мають гіперплоїдний каріотип з множинними хромосомними абераціями, характерними для багатьох видів колоректального раку. До них відносяться мутації в ключових онкогенах і генах-супресорах пухлин, таких як мутації в гені KRAS і делеції, що впливають на шлях р53, які беруть участь в патогенезі і прогресуванні колоректального раку. Ці генетичні особливості роблять клітини HCT-15 важливим інструментом для дослідження генетичних і молекулярних механізмів, пов'язаних з прогресуванням раку, метастазуванням і резистентністю до терапії.

Широке використання клітин HCT-15 у дослідженнях дозволило значно глибше зрозуміти молекулярні шляхи розвитку колоректального раку, поглибити наше розуміння механізмів захворювання та допомогти у розробці таргетованої терапії.

Тканина
Колоректальний
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
  • HCT 15
  • HCT.15
  • HCT15

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
У голих мишей
Час подвоєння
15 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HCT-15 (номер за каталогом Cytion 300229)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0292

05Експресія та сприйнятливість

Експресія антигену
Клітини позитивно реагують на кератин за допомогою імунопероксидазного забарвлення.
Віруси
Негативна зворотна транскриптаза

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1 до 2 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Швидко
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
67 років