Komórki HCT-15
Cell line · Numer produktu 300229
Komórki HCT-15 pochodzą z gruczolakoraka jelita grubego 44-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej. Ta linia komórkowa, wyhodowana na początku lat 70., jest szeroko stosowana...
Dostosowanie / Zalecenia
- Komórki HCT-15Cell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Komórki HCT-15 pochodzą z gruczolakoraka okrężnicy 44-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej. Ta linia komórkowa, opracowana na początku lat 70-tych XX wieku, jest szeroko wykorzystywana w badaniach nad rakiem, zwłaszcza do badania biologii i leczenia raka jelita grubego.
Morfologicznie, komórki HCT-15 charakteryzują się wyglądem przypominającym nabłonek z tendencją do wzrostu zarówno jako jednowarstwowe, jak i w skupiskach, wykazując znaczną heterogeniczność komórkową. Cecha ta odzwierciedla zróżnicowane środowiska komórkowe występujące w guzach litych, czyniąc HCT-15 cennym modelem do badania dynamiki guza i interakcji komórkowych w mikrośrodowisku guza.
Genotypowo, komórki HCT-15 wykazują hiperdiploidalny kariotyp z wieloma aberracjami chromosomalnymi, typowymi dla wielu nowotworów jelita grubego. Obejmują one mutacje w kluczowych onkogenach i genach supresorowych nowotworów, takich jak mutacje w genie KRAS i delecje wpływające na szlak p53, które są zaangażowane w patogenezę i progresję raka jelita grubego. Te cechy genetyczne sprawiają, że komórki HCT-15 są kluczowym narzędziem do badania mechanizmów genetycznych i molekularnych związanych z progresją raka, przerzutami i opornością na terapie.
Szerokie zastosowanie komórek HCT-15 w badaniach doprowadziło do znacznego wglądu w szlaki molekularne zaangażowane w raka jelita grubego, zwiększając nasze zrozumienie mechanizmów choroby i pomagając w opracowaniu ukierunkowanych terapii.
- Chusteczka
- Jelito grube
- Choroba
- Gruczolakorak
- Synonimy
- HCT 15
- HCT.15
- HCT15
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Nowotworotwórczy
- U nagich myszy
- Czas podwojenia
- 15 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- HCT-15 (numer katalogowy Cytion 300229)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0292
05Ekspresja i podatność
- Ekspresja antygenu
- Komórki są dodatnie pod względem keratyny w barwieniu immunoperoksydazą.
- Wirusy
- Odwrotna transkryptaza ujemna
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 1 do 2 x 104 komórek/cm2
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Szybko
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 67 lat
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
