Ga naar de inhoud
HCT-15-cellen
Weefsel
Colorectaal
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
HCT 15, HCT.15, HCT15

Documenten

HCT-15-cellen

Cell line · Productnummer 300229

HCT-15-cellen zijn afkomstig van het adenocarcinoom van de dikke darm van een 44-jarige blanke man. Deze cellijn, die begin jaren zeventig werd ontwikkeld, wordt op grote schaal gebruikt...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HCT-15 cellen zijn afkomstig van het adenocarcinoom van de dikke darm van een 44-jarige Kaukasische man. Deze cellijn, ontwikkeld in het begin van de jaren 1970, wordt veel gebruikt voor kankeronderzoek, met name voor het onderzoeken van de biologie en behandeling van colorectale kanker.

Morfologisch worden HCT-15 cellen gekenmerkt door een epitheelachtig uiterlijk met de neiging om zowel als monolaag als in clusters te groeien, waarbij ze een aanzienlijke cellulaire heterogeniteit vertonen. Dit kenmerk weerspiegelt de gevarieerde cellulaire omgevingen die in vaste tumoren worden aangetroffen, waardoor HCT-15 een waardevol model is voor het bestuderen van tumordynamica en cellulaire interacties binnen de tumormicro-omgeving.

Genotypisch vertonen HCT-15 cellen een hyperdiploïd karyotype met meerdere chromosoomafwijkingen, typisch voor veel colorectale kankers. Deze omvatten mutaties in belangrijke oncogenen en tumorsuppressorgenen, zoals mutaties in het KRAS-gen en deleties die de p53-route beïnvloeden, die betrokken zijn bij de pathogenese en progressie van colorectale kanker. Deze genetische eigenschappen maken HCT-15 cellen tot een cruciaal instrument voor het onderzoeken van genetische en moleculaire mechanismen die verband houden met kankerprogressie, metastase en resistentie tegen therapieën.

Het brede gebruik van HCT-15 cellen in onderzoek heeft geleid tot belangrijke inzichten in de moleculaire routes die betrokken zijn bij dikkedarmkanker, waardoor ons begrip van ziektemechanismen is verbeterd en de ontwikkeling van gerichte therapieën is bevorderd.

Weefsel
Colorectaal
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
  • HCT 15
  • HCT.15
  • HCT15

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
In naakte muizen
Verdubbelingstijd
15 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HCT-15 (Cytion catalogusnummer 300229)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0292

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
De cellen zijn positief voor keratine door immunoperoxidase kleuring.
Virussen
Omgekeerde transcriptase negatief

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1 tot 2 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Snel
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
67 jaar