Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα HCT-15
Ιστός
Κολοορθικό
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
HCT 15, HCT.15, HCT15

Έγγραφα

Κύτταρα HCT-15

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300229

Τα κύτταρα HCT-15 προέρχονται από αδενοκαρκίνωμα του παχέος εντέρου ενός 44χρονου άνδρα καυκάσιας καταγωγής. Αυτή η κυτταρική σειρά, η οποία αναπτύχθηκε στις αρχές της δεκαετίας του 1970, χρησιμοποιείται ευρέως...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα HCT-15 προέρχονται από το αδενοκαρκίνωμα του παχέος εντέρου ενός 44χρονου Καυκάσιου άνδρα. Αυτή η κυτταρική σειρά, που αναπτύχθηκε στις αρχές της δεκαετίας του 1970, χρησιμοποιείται ευρέως στον τομέα της έρευνας του καρκίνου, ιδίως για τη διερεύνηση της βιολογίας και της θεραπείας του καρκίνου του παχέος εντέρου.

Μορφολογικά, τα κύτταρα HCT-15 χαρακτηρίζονται από επιθηλιοειδή εμφάνιση με τάση να αναπτύσσονται τόσο ως μονοστρωματικά όσο και σε ομάδες, εμφανίζοντας σημαντική κυτταρική ετερογένεια. Το χαρακτηριστικό αυτό αντικατοπτρίζει τα ποικίλα κυτταρικά περιβάλλοντα που απαντώνται στους συμπαγείς όγκους, καθιστώντας το HCT-15 ένα πολύτιμο μοντέλο για τη μελέτη της δυναμικής του όγκου και των κυτταρικών αλληλεπιδράσεων εντός του μικροπεριβάλλοντος του όγκου.

Από γονοτυπική άποψη, τα κύτταρα HCT-15 παρουσιάζουν υπερδιπλοειδή καρυότυπο με πολλαπλές χρωμοσωμικές ανωμαλίες, χαρακτηριστικό πολλών καρκίνων του παχέος εντέρου. Αυτές περιλαμβάνουν μεταλλάξεις σε βασικά ογκογονίδια και ογκοκατασταλτικά γονίδια, όπως μεταλλάξεις στο γονίδιο KRAS και διαγραφές που επηρεάζουν το μονοπάτι p53, τα οποία εμπλέκονται στην παθογένεια και την εξέλιξη του καρκίνου του παχέος εντέρου. Αυτά τα γενετικά χαρακτηριστικά καθιστούν τα κύτταρα HCT-15 ένα κρίσιμο εργαλείο για τη διερεύνηση γενετικών και μοριακών μηχανισμών που σχετίζονται με την εξέλιξη του καρκίνου, τη μετάσταση και την αντίσταση στις θεραπείες.

Η ευρεία χρήση των κυττάρων HCT-15 στην έρευνα έχει οδηγήσει σε σημαντικές γνώσεις σχετικά με τα μοριακά μονοπάτια που εμπλέκονται στον καρκίνο του παχέος εντέρου, ενισχύοντας την κατανόηση των μηχανισμών της νόσου και βοηθώντας στην ανάπτυξη στοχευμένων θεραπειών.

Ιστός
Κολοορθικό
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα
Συνώνυμα
  • HCT 15
  • HCT.15
  • HCT15

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Σε γυμνά ποντίκια
Χρόνος διπλασιασμού
15 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HCT-15 (αριθμός καταλόγου Cytion 300229)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0292

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
Τα κύτταρα είναι θετικά για κερατίνη με χρώση ανοσοϋπεροξειδάσης.
Ιοί
Αντίστροφη μεταγραφάση αρνητική

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 έως 2 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Γρήγορη
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
67 χρόνια