Preskoči na vsebino
Celice HCT-15
Tkivo
Kolorektalno
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
HCT 15, HCT.15, HCT15

Dokumenti

Celice HCT-15

Cell line · Številka izdelka 300229

Celice HCT-15 izvirajo iz adenokarcinoma debelega črevesa 44-letnega moškega kavkazske rase. Ta celična linija, razvita v zgodnjih 70. letih prejšnjega stoletja, se pogosto uporablja...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice HCT-15 so pridobljene iz adenokarcinoma debelega črevesa 44-letnega kavkaškega moškega. Ta celična linija, razvita v začetku sedemdesetih let prejšnjega stoletja, se pogosto uporablja na področju raziskav raka, zlasti za raziskovanje biologije in zdravljenja kolorektalnega raka.

Morfološko so celice HCT-15 podobne epitelijskim celicam, rastejo v monoslojih in skupkih ter kažejo veliko celično heterogenost. Ta značilnost odraža raznolikost celičnih okolij v solidnih tumorjih, zato je HCT-15 dragocen model za preučevanje dinamike tumorja in celičnih interakcij v tumorskem mikrookolju.

Genotipsko imajo celice HCT-15 hiperdiploidni kariotip s številnimi kromosomskimi aberacijami, ki so značilne za številne vrste raka debelega črevesa in danke. Te vključujejo mutacije v ključnih onkogenih in tumorskih supresorskih genih, kot so mutacije v genu KRAS in delecije, ki vplivajo na pot p53, ki so vpletene v patogenezo in napredovanje kolorektalnega raka. Zaradi teh genetskih lastnosti so celice HCT-15 ključno orodje za raziskovanje genetskih in molekularnih mehanizmov, povezanih z napredovanjem raka, metastaziranjem in odpornostjo na terapije.

Široka uporaba celic HCT-15 v raziskavah je omogočila pomemben vpogled v molekularne poti, povezane z rakom debelega črevesa in danke, kar je izboljšalo naše razumevanje mehanizmov bolezni in pripomoglo k razvoju ciljnih terapij.

Tkivo
Kolorektalno
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
  • HCT 15
  • HCT.15
  • HCT15

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Na golih miših
Čas podvojitve
15 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HCT-15 (kataloška številka Cytion 300229)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0292

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
Celice so z imunoperoksidaznim barvanjem pozitivne na keratin.
Virusi
Reverzna transkriptaza negativna

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 do 2 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Hitro
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
67 let