Přejít na obsah
Buňky HCT-15
Tkáň
Kolorektální
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
HCT 15, HCT.15, HCT15

Dokumenty

Buňky HCT-15

Cell line · Číslo výrobku 300229

Buňky HCT-15 pocházejí z adenokarcinomu tlustého střeva 44letého muže kavkazského původu. Tato buněčná linie, vyvinutá na počátku 70. let, se široce používá...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky HCT-15 pocházejí z adenokarcinomu tlustého střeva 44letého muže kavkazské rasy. Tato buněčná linie, vyvinutá na počátku 70. let 20. století, je široce využívána v oblasti výzkumu rakoviny, zejména pro zkoumání biologie a léčby kolorektálního karcinomu.

Morfologicky se buňky HCT-15 vyznačují epiteliálním vzhledem s tendencí růst jak v monovrstvě, tak ve shlucích, přičemž vykazují značnou buněčnou heterogenitu. Tato vlastnost odráží rozmanité buněčné prostředí, které se vyskytuje v solidních nádorech, a činí z HCT-15 cenný model pro studium dynamiky nádoru a buněčných interakcí v nádorovém mikroprostředí.

Genotypově vykazují buňky HCT-15 hyperdiploidní karyotyp s četnými chromozomálními aberacemi, které jsou typické pro mnoho kolorektálních karcinomů. Ty zahrnují mutace v klíčových onkogenech a nádorových supresorových genech, jako jsou mutace v genu KRAS a delece ovlivňující dráhu p53, které se podílejí na patogenezi a progresi kolorektálního karcinomu. Díky těmto genetickým vlastnostem jsou buňky HCT-15 klíčovým nástrojem pro zkoumání genetických a molekulárních mechanismů spojených s progresí rakoviny, metastazováním a rezistencí na léčbu.

Široké využití buněk HCT-15 ve výzkumu vedlo k významným poznatkům o molekulárních drahách souvisejících s kolorektálním karcinomem, což zlepšilo naše chápání mechanismů onemocnění a pomohlo při vývoji cílených terapií.

Tkáň
Kolorektální
Nemoc
Adenokarcinom
Synonyma
  • HCT 15
  • HCT.15
  • HCT15

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
U nahých myší
Doba zdvojnásobení
15 hodin

04Identifikátory

Citace
HCT-15 (katalogové číslo Cytion 300229)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0292

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
Buňky jsou pozitivní na keratin při barvení imunoperoxidázou.
Viry
Reverzní transkriptáza negativní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 2 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Rychle
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
67 let