الانتقال إلى المحتوى
خلايا SH-SY5Y
الأنسجة
النخاع العظمي
المرض
الورم الأرومي العصبي
موقع الانتشار
النخاع العظمي
المرادفات
SH-Sy5y, SHSY5Y, SHSY-5Y, SK-SH-SY5Y, SY5Y, SH-SY5Y Parental

المستندات

خلايا SH-SY5Y

Cell line · رقم المنتج 300154

تُعد خلايا SH-SY5Y، وهي مستنسخ فرعي مشتق من سلالة الخلايا السرطانية SK-N-SH الخاصة بورم الخلايا العصبية، نموذجًا خلويًّا قيّمًا لدراسة الاضطرابات العصبية التنكسية مثل مرض باركنسون...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تُعد خلايا SH-SY5Y، وهي نسخة فرعية مشتقة من خط الخلايا السرطانية للورم الأرومي العصبي SK-N-SH، نموذجاً خلوياً قيماً للاضطرابات العصبية التنكسية مثل مرض باركنسون ومرض الزهايمر. تم إنشاء خط الخلايا SK-N-SH في عام 1970 من خزعة من ورم عظمي نقيلي من مريض بالسرطان يبلغ من العمر 4 سنوات. يوفر خط خلايا SH-SY5Y البشري مصدراً فريداً من نوعه للخلايا لإجراء دراسات وظيفية في علم الأعصاب وأبحاث الأمراض العصبية التنكسية.

تنمو خلايا SH-SY5Y على حد سواء ملتصقة ومعلقة على حد سواء، وتشكل مجموعات أثناء الانقسام تختلف بشكل كبير عن شكل الخلايا المتمايزة. تُستخدم هذه الخلايا غير المتمايزة، قبل خضوعها للتمايز العصبي، كأساس أساسي للدراسات العلمية العصبية.

يتم تحقيق التمايز العصبي لخلايا SH-SY5Y، والذي يحولها إلى نماذج خلايا عصبية تشبه الخلايا العصبية الوظيفية المختلفة، من خلال عمليات التحويل الكيميائي الحيوي البيني التي تتضمن الحرمان التدريجي من المصل، وحمض الريتينويك، وعوامل التغذية العصبية مثل عامل التغذية العصبية المشتق من الدماغ، وبروتينات المصفوفة خارج الخلية. ويُعد هذا التمايز أمرًا بالغ الأهمية لدراسة العلامات العصبية وإجراء أبحاث علم السموم العصبية، خاصة فيما يتعلق بتأثير الملوثات العضوية على الخلايا الشبيهة بالخلايا العصبية البشرية.

يمكن استكشاف البيولوجيا العصبية لخلايا الورم الأرومي العصبي SH-SY5Y، المعروفة في المقام الأول بخصائصها الدوبامينية (الدوبامينية)، لمعرفة خصائصها الكولينية في ظل ظروف تمايز محددة. وعلى الرغم من أن هذه الخلايا قد تعبر عن إنزيم الأسيتيل كولينستريز، مما يدل على بعض النشاط الكوليني إلا أن فائدتها في دراسة النقل العصبي الكوليني أقل وضوحًا مقارنة بدورها في دراسات نظام الدوبامين.

كنموذج للسموم العصبية، يعتبر خط خلايا الورم الأرومي العصبي SH-SY5Y مفيدًا في دراسة تأثيرات المركبات على أنشطة إنزيمات الأسيتيل كولينستريز وبوتريل كولينستريز، وهي ضرورية لدراسات السمية العصبية. إن إسهام خط الخلايا العصبية sy5y في فهم المسارات الكيميائية الحيوية المتورطة في الأمراض العصبية التنكسية، إلى جانب دوره في الدراسات الوظيفية لأنظمة الدوبامين والكولينستراز، يؤكد قيمته في أبحاث علم الأعصاب.

الأنسجة
النخاع العظمي
المرض
الورم الأرومي العصبي
موقع الانتشار
النخاع العظمي
المرادفات
  • SH-Sy5y
  • SHSY5Y
  • SHSY-5Y
  • SK-SH-SY5Y
  • SY5Y
  • SH-SY5Y Parental

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
تنمو الخلايا على شكل مجموعات من الخلايا العصبية البلاستيكية ذات عمليات خلوية متعددة وقصيرة ودقيقة (النتوءات العصبية). تتجمع الخلايا وتشكل كتلاً وتطفو. لا تتشكل طبقة أحادية متكتلة.
نوع الخلية
نيوروبلاست
مُسبِّب للأورام
تشكل الأورام في الفئران العارية في غضون 3-4 أسابيع تقريبًا.
النمط الكروموسومي
يتسم المشهد الوراثي الخلوي لخلايا SH-SY5Y بانحرافات كروموسومية معقدة، لا سيما أن عدد الكروموسومات النموذجية يبلغ 47، بما في ذلك تثلث الصبغي 1q بسبب إدخال مميز في الكروموسوم 1. تعد هذه الخلفية الجينية حاسمة لفهم البيولوجيا الخلوية والقدرة التكوينية لخلايا SH-SY5Y، مما يجعلها نموذجًا متعدد الاستخدامات في الأبحاث العلمية العصبية، خاصة في مجالات النمو العصبي والسمية العصبية ودراسات الأمراض العصبية التنكسية.

04المعرّفات

المرجع
SH-SY5Y (كتالوج سيتيون رقم 300154)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0019

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
يُرجى خلط EMEM وهامز F12 بنسبة 50:50 (رقمي المادة 820100a و820600a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
أضف إلى الوسط 15٪ FBS و 1٪ NEAA
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
تنمو هذه الخلايا كمزيج من الخلايا الطافية والملتصقة. إزالة الوسط مع الخلايا العائمة، واستعادة الخلايا عن طريق الطرد المركزي. اشطف الخلايا الملتصقة باستخدام PBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم (3-5 مل من PBS لكل T25، 5-10 مل لقوارير زراعة الخلايا T75). إضافة أكوتاز (1-2 مل لكل T25، 2.5 مل لكل قارورة زراعة خلايا T75)، يجب تغطية صفيحة الخلية بالكامل. احتضانها عند 37 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. تُمزج مع الخلايا العائمة المستعادة أعلاه. يُعاد ترسيب الخلايا بعناية، وتكون إضافة الوسط اختيارية ولكنها ليست ضرورية، ويتم توزيعها في قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
كثافة البذر بعد الذوبان 6x104 خلية/سم2، زرع في قارورة زراعة خلايا 1x T25. ستصبح الخلايا متقاربة بنسبة 80-90% في غضون 1-2 أسبوع. بمجرد أن تتكاثر الخلايا بقوة، قم بزرع الخلايا بكثافة 1 - 2 x104 خلية/سم2.
تجديد السوائل
1 إلى 2 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 50% من الوسط القاعدي + 40% من الحمض الأميني القاعدي + 10% من DMSO، أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
4 سنوات