Mine otse sisu juurde
SH-SY5Y rakud
Kude
Luuüdi
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
SH-Sy5y, SHSY5Y, SHSY-5Y, SK-SH-SY5Y, SY5Y, SH-SY5Y Parental

Dokumendid

SH-SY5Y rakud

Cell line · Toote number 300154

SH-SY5Y rakud, mis on neuroblastoomi vähirakuliinist SK-N-SH pärinev subkloon, on väärtuslik rakumudel neurodegeneratiivsete haiguste, nagu Parki...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SH-SY5Y rakud, mis on neuroblastoomi vähirakuliinist SK-N-SH saadud subkloon, on väärtuslik rakumudel neurodegeneratiivsete haiguste, näiteks Parkinsoni ja Alzheimeri tõve uurimiseks. SK-N-SH rakuliin loodi 1970. aastal 4-aastase vähipatsiendi metastaatilise luukasvaja biopsiast. Inimese SH-SY5Y rakuliin pakub ainulaadset rakuallikat neurobioloogia ja neurodegeneratiivsete haiguste funktsionaalsete uuringute jaoks.

SH-SY5Y rakud kasvavad nii adherentselt kui ka suspensioonis, moodustades jagunemisel klastreid, mis erinevad oluliselt diferentseeritud rakkude morfoloogiast. Need diferentseerimata rakud on enne neuronaalset diferentseerumist oluliseks aluseks neuroteaduslikele uuringutele.

SH-SY5Y rakkude neuronaalne diferentseerumine, mis muudab need mitmesuguseid funktsionaalseid neuroneid meenutavateks neuronaalseteks rakumudeliteks, saavutatakse biokeemiliste muundumisprotsesside kaudu, mis hõlmavad järkjärgulist seerumi äravõtmist, retinoiinhapet, neurotroofseid faktoreid, nagu ajust saadav neurotroofne faktor, ja rakuväliseid maatriksvalke. Selline diferentseerimine on oluline neuronaalsete markerite uurimiseks ja neurotoksikoloogiliste uuringute läbiviimiseks, eelkõige seoses orgaaniliste saasteainete mõjuga inimese neuronilaadsetele rakkudele.

SH-SY5Y neuroblastoomirakkude neurobioloogiat, mis on peamiselt tuntud nende dopamiinergiliste omaduste poolest, saab uurida kolinergiliste omaduste osas konkreetsetes diferentseerimistingimustes. Kuigi need rakud võivad ekspresseerida atsetüülkoliinesteraasi, mis viitab teatavale kolinergilisele aktiivsusele, on nende kasulikkus kolinergilise neurotransmissiooni uurimisel vähem väljendunud võrreldes nende rolliga dopamiinergilise süsteemi uuringutes.

Neurotoksikoloogilise mudelina on SH-SY5Y neuroblastoomi rakuliin oluline neurotoksikoloogilistes uuringutes kasutatavate ühendite mõju uurimiseks atsetüülkoliinesteraasi ja butürüülkoliinesteraasi aktiivsusele. Sy5y rakuliini panus neurodegeneratiivsete haiguste biokeemiliste radade mõistmisse koos selle rolliga dopamiinergiliste ja kolinergiliste süsteemide funktsionaalsetes uuringutes rõhutab selle väärtust neuroteaduslikes uuringutes.

Kude
Luuüdi
Haigus
Neuroblastoom
Metastaaside asukoht
Luuüdi
Sünonüümid
  • SH-Sy5y
  • SHSY5Y
  • SHSY-5Y
  • SK-SH-SY5Y
  • SY5Y
  • SH-SY5Y Parental

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Rakud kasvavad neuroblastiliste rakkude klastritena, millel on mitu lühikest, peenikest rakuotsakut (neuriiti). Rakud koonduvad, moodustavad kobaraid ja hõljuvad. Konfluentset monokihti ei moodustu.
Rakutüüp
Neuroblast
Tuumorigeenne
Moodustab alasti hiirtel kasvajaid umbes 3-4 nädala jooksul.
Karyotüüp
SH-SY5Y rakkude tsütogeneetilist maastikku iseloomustavad keerulised kromosoomiaberratsioonid, eelkõige kromosoomide modaalne arv 47, sealhulgas 1q trisoomia, mis tuleneb kromosoomi 1 eripärasest sisestusest. See geneetiline taust on oluline SH-SY5Y rakkude rakubioloogia ja onkogeense potentsiaali mõistmiseks, mis muudab need rakud mitmekülgseks mudeliks neuroteaduslikes uuringutes, eriti neuroloogilise arengu, neurotoksilisuse ja neurodegeneratiivsete haiguste uurimisel.

04Tunnused

Viide
SH-SY5Y (Cytioni katalooginumber 300154)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0019

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Palun segage EMEM ja Ham's F12 50:50 vahekorras (Cytioni artikli numbrid 820100a ja 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendage keskkonda 15% FBS-i ja 1% NEAA-ga.
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Need rakud kasvavad ujuvate ja kleepuvate rakkude seguna. Eemaldage keskkond koos hõljuvate rakkudega ja võtke rakud tsentrifuugimise teel tagasi. Loputage kleepuvad rakud, kasutades PBS-i ilma kaltsiumi ja magneesiumita (3-5 ml PBS-i T25, 5-10 ml T75 rakukultuurikolbide puhul). Lisage Accutase (1-2 ml T25, 2,5 ml T75 rakukultuurikolbi kohta), rakukile peab olema täielikult kaetud. Inkubeerige 37 kraadi juures 10 minutit. Kombineeritakse ülaltoodud hõljuvate rakkudega. Resuspendeerige rakud ettevaatlikult, söötme lisamine on vabatahtlik, kuid mitte vajalik, ja doseerige uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötme.
Külvitihedus
Külvitihedus pärast sulatamist 6x104 rakku/cm2, külvata 1x T25 rakukultuuri kolbi. Rakud muutuvad 1–2 nädala jooksul 80–90% konfluentseks. Kui rakud on jõudsalt paljunenud, külvata rakud tihedusega 1–2 x104 rakku/cm2.
Vedeliku vahetus
1 kuni 2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüokonserveerimissöötmena kasutame 50% põhikeskkonda + 40% FBS + 10% DMSO ehk CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüoostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
4 aastat