Gå til innholdet
SH-SY5Y-celler
Vev
Benmarg
Sykdom
Nevroblastom
Metastaseområde
Benmarg
Synonymer
SH-Sy5y, SHSY5Y, SHSY-5Y, SK-SH-SY5Y, SY5Y, SH-SY5Y Parental

Dokumenter

SH-SY5Y-celler

Cell line · Produktnummer 300154

SH-SY5Y-celler, en subklon avledet fra nevroblastom-kreftcellelinjen SK-N-SH, er en verdifull cellemodell for nevrodegenerative sykdommer som Parki...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

SH-SY5Y-celler, en subklon avledet fra nevroblastomkreftcellelinjen SK-N-SH, er en verdifull cellemodell for nevrodegenerative sykdommer som Parkinsons og Alzheimers sykdom. SK-N-SH-cellelinjen ble etablert i 1970 fra en biopsi av en metastatisk beintumor fra en fire år gammel kreftpasient. Den humane SH-SY5Y-cellelinjen er en unik cellekilde for funksjonelle studier innen nevrobiologi og forskning på nevrodegenerative sykdommer.

SH-SY5Y-celler vokser både adherent og i suspensjon, og danner klynger under delingen som skiller seg betydelig fra morfologien til differensierte celler. Disse udifferensierte cellene, som ikke gjennomgår nevronal differensiering, utgjør et viktig grunnlag for nevrovitenskapelige studier.

Den nevronale differensieringen av SH-SY5Y-celler, som forvandler dem til nevronale cellemodeller som ligner ulike funksjonelle nevroner, oppnås gjennom biokjemiske interkonverteringsprosesser som involverer gradvis serumdeprivasjon, retinsyre, nevrotrofiske faktorer som hjerneavledet nevrotrofisk faktor og ekstracellulære matriksproteiner. Denne differensieringen er avgjørende for å kunne studere nevronmarkører og utføre nevrotoksikologisk forskning, særlig når det gjelder virkningen av organiske miljøgifter på humane nevronlignende celler.

Nevrobiologien til SH-SY5Y nevroblastomceller, som først og fremst er kjent for sine dopaminerge egenskaper, kan undersøkes med tanke på kolinerge egenskaper under spesifikke differensieringsbetingelser. Selv om disse cellene kan uttrykke acetylkolinesterase, noe som indikerer en viss kolinerg aktivitet, er deres nytteverdi i studier av kolinerg nevrotransmisjon mindre utpreget sammenlignet med deres rolle i studier av det dopaminerge systemet.

Som nevrotoksikologisk modell er SH-SY5Y-nevroblastomcellelinjen viktig for å undersøke effekten av forbindelser på acetylkolinesterase- og butyrylkolinesteraseaktivitet, noe som er essensielt for nevrotoksikologiske studier. SH-SY5Y-cellelinjens bidrag til forståelsen av de biokjemiske veiene som er involvert i nevrodegenerative sykdommer, kombinert med dens rolle i funksjonelle studier av dopaminerge og kolinerge systemer, understreker dens verdi i nevrovitenskapelig forskning.

Vev
Benmarg
Sykdom
Nevroblastom
Metastaseområde
Benmarg
Synonymer
  • SH-Sy5y
  • SHSY5Y
  • SHSY-5Y
  • SK-SH-SY5Y
  • SY5Y
  • SH-SY5Y Parental

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Cellene vokser som klynger av nevroblastceller med mange, korte og fine celleprosesser (nevritter). Cellene aggregerer, danner klumper og flyter. Det dannes ikke et konfluerende monolag.
Celletype
Neuroblast
Tumorinduserende
Danner svulster i nakenmus i løpet av ca. 3-4 uker.
Karyotype
SH-SY5Y-cellenes cytogenetiske landskap er preget av komplekse kromosomavvik, særlig med et modalt kromosomnummer på 47, inkludert trisomi av 1q på grunn av en særegen innsetting i kromosom 1. Dette genetiske bakteppet er avgjørende for å forstå SH-SY5Y-cellenes cellulære biologi og onkogene potensial, noe som gjør dem til en allsidig modell i nevrovitenskapelig forskning, særlig når det gjelder studier av nevroutvikling, nevrotoksisitet og nevrodegenerative sykdommer.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SH-SY5Y (Cytion-katalognummer 300154)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0019

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
Bland EMEM og Ham's F12 i forholdet 50:50 (Cytion artikkelnummer 820100a og 820600a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 15 % FBS og 1 % NEAA til mediet.
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Disse cellene vokser som en blanding av flytende og adherente celler. Fjern mediet med de flytende cellene, og gjenvinn cellene ved sentrifugering. Skyll de adherente cellene med PBS uten kalsium og magnesium (3-5 ml PBS for T25, 5-10 ml for T75-cellekulturflasker). Tilsett Accutase (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75-cellekulturkolbe), cellearket må være helt dekket. Inkuber ved 37 grader Celsius i 10 minutter. Kombiner med de flytende cellene som er utvunnet ovenfor. Resuspender cellene forsiktig, tilsetning av medium er valgfritt, men ikke nødvendig, og fordel dem i nye kolber som inneholder friskt medium.
Såtetthet
Så tetthet etter tining 6x104 celler/cm2, så i 1x T25 cellekulturflaske. Cellene vil bli 80-90 % konfluente innen 1-2 uker. Når cellene har spredt seg kraftig, så cellene ut med en tetthet på 1 - 2 x104 celler/cm2.
Væskefornyelse
1 til 2 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
4 år