Células SH-SY5Y

As células SH-SY5Y, um subclone derivado da linhagem celular cancerosa de neuroblastoma SK-N-SH, constituem um valioso modelo celular para doenças neurodegenerativas, como a doença de Parkinson e a doença de Alzheimer. A linhagem celular SK-N-SH foi estabelecida em 1970 a partir de uma biópsia de um tumor ósseo metastático de um paciente com câncer de 4 anos de idade. A linhagem celular humana SH-SY5Y oferece uma fonte celular única para estudos funcionais em neurobiologia e pesquisa de doenças neurodegenerativas.

As células SH-SY5Y crescem tanto de forma aderente quanto em suspensão, formando aglomerados durante a divisão que diferem significativamente da morfologia das células diferenciadas. Essas células indiferenciadas, antes de passarem pela diferenciação neuronal, servem como base essencial para estudos neurocientíficos.

A diferenciação neuronal das células SH-SY5Y, que as transforma em modelos de células neuronais semelhantes a vários neurônios funcionais, é alcançada por meio de processos de interconversão bioquímica envolvendo privação gradual de soro, ácido retinóico, fatores neurotróficos como o fator neurotrófico derivado do cérebro e proteínas da matriz extracelular. Essa diferenciação é crucial para o estudo de marcadores neuronais e a realização de pesquisas em neurotoxicologia, especialmente no que diz respeito ao impacto de poluentes orgânicos em células semelhantes aos neurônios humanos.

A neurobiologia das células de neuroblastoma SH-SY5Y, conhecidas principalmente por suas características dopaminérgicas, pode ser explorada quanto às propriedades colinérgicas sob condições específicas de diferenciação. Embora essas células possam expressar acetilcolinesterase, o que indica alguma atividade colinérgica, sua utilidade no estudo da neurotransmissão colinérgica é menos pronunciada em comparação com seu papel nos estudos do sistema dopaminérgico.

Como modelo neurotoxicológico, a linhagem celular de neuroblastoma SH-SY5Y é fundamental para examinar os efeitos de compostos nas atividades da acetilcolinesterase e da butirilcolinesterase, essenciais para estudos de neurotoxicologia. A contribuição da linha SH-SY5Y para a compreensão das vias bioquímicas envolvidas em doenças neurodegenerativas, aliada ao seu papel nos estudos funcionais dos sistemas dopaminérgico e colinérgico, ressalta seu valor na pesquisa em neurociência.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.