Přejít na obsah
Buňky Capan-1
Tkáň
Pankreas
Nemoc
Duktální adenokarcinom
Místo metastázy
Játra
Synonyma
CaPan-1, CAPAN-1, Capan 1, CAPAN 1, Capan1, CAPAN1

Dokumenty

Buňky Capan-1

Cell line · Číslo výrobku 300143

Buněčná linie Capan-1 pochází z lidského adenokarcinomu slinivky břišní a byla izolována z ascitické tekutiny 40letého muže kavkazského původu. Byla...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie Capan-1 je odvozena od lidského adenokarcinomu pankreatu a byla vytvořena z ascitické tekutiny 40letého muže kavkazské rasy. Poprvé byla charakterizována v roce 1975 a vyznačuje se zejména duktální epiteliální morfologií, která se velmi podobá morfologii primárních nádorů pankreatu. Buňky Capan-1 jsou hojně využívány ve výzkumu zaměřeném na pochopení biologie rakoviny slinivky břišní, včetně studií progrese nádoru, metastazování a rezistence na léčbu. Tato buněčná linie je dobře známá pro svou schopnost produkovat mucin, což je charakteristický rys mnoha adenokarcinomů slinivky břišní, a slouží tak jako model mucinózního karcinomu slinivky břišní.

Z genetického hlediska se v buňce Capan-1 vyskytují mutace genu KRAS, které jsou typické pro karcinom slinivky břišní, a také změny v dalších genech souvisejících s rakovinou, jako jsou TP53 a SMAD4. Díky těmto mutacím je buněčná linie Capan-1 cenným nástrojem pro studium molekulárních mechanismů, které jsou základem rakoviny slinivky břišní, a pro preklinické hodnocení nových terapeutických látek zaměřených na tyto dráhy. Kromě toho se buňky Capan-1 používají ke studiu biologie kmenových buněk rakoviny slinivky břišní, což umožňuje nahlédnout do chování, které je příčinou recidivy rakoviny a rezistence vůči konvenční léčbě.

Tkáň
Pankreas
Nemoc
Duktální adenokarcinom
Místo metastázy
Játra
Synonyma
  • CaPan-1
  • CAPAN-1
  • Capan 1
  • CAPAN 1
  • Capan1
  • CAPAN1

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Tumorogenní
Forma adenokarcinomu odpovídající karcinomu pankreatického vývodu
Karyotyp
(P7) hypotriploidní s abnormalitami včetně dicentrik, zlomů, akrocentrických fragmentů, velkých submetacentrických a subtelocentrických chromozomů a drobných markerů
Doba zdvojnásobení
60 až 80 hodin

04Identifikátory

Citace
Capan-1 (katalogové číslo Cytion 300143)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0237

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
P53 negativní
Exprese antigenu
Krevní skupina A, Rh+
Isoenzymy
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 1-2, produkt fenotypové frekvence: 0.0311
Mutační profil
Buňky Capan-1 nesou homozygotní mutaci Krasu v kodonu 12: GGT(Gly) >GTT(Val)
Produkty
Mucin

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 x 104 buněk/cm2 bude mít za následek 90% konfluentní monovrstvu za přibližně 7 dní.
Obnova tekutin
Každé 3 dny
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 48 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
40 let