Gå til innholdet
Capan-1-celler
Vev
Bukspyttkjertelen
Sykdom
Duktalt adenokarsinom
Metastaseområde
Lever
Synonymer
CaPan-1, CAPAN-1, Capan 1, CAPAN 1, Capan1, CAPAN1

Dokumenter

Capan-1-celler

Cell line · Produktnummer 300143

Capan-1-cellelinjen stammer fra et humant adenokarsinom i bukspyttkjertelen og ble etablert fra ascitesvæske fra en 40 år gammel kaukasisk mann. Den ble...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Capan-1-cellelinjen er avledet fra et humant adenokarsinom i bukspyttkjertelen og ble etablert fra askesevæsken til en 40 år gammel kaukasisk mann. Den ble først karakterisert i 1975, og er spesielt kjent for sin duktale epitelmorfologi, som er svært lik den man finner i primære bukspyttkjertelsvulster. Capan-1-celler brukes i stor utstrekning i forskning som tar sikte på å forstå bukspyttkjertelkreftbiologi, inkludert studier av tumorprogresjon, metastase og behandlingsresistens. Denne cellelinjen er kjent for sin evne til å produsere mucin, et karakteristisk trekk ved mange adenokarsinomer i bukspyttkjertelen, og fungerer dermed som en modell for mucinøs bukspyttkjertelkreft.

Genetisk sett har Capan-1 mutasjoner i KRAS-genet, som er typisk for kreft i bukspyttkjertelen, i tillegg til endringer i andre kreftrelaterte gener som TP53 og SMAD4. Disse mutasjonene gjør Capan-1-cellelinjen til et verdifullt verktøy for å studere de molekylære mekanismene som ligger til grunn for kreft i bukspyttkjertelen, og for preklinisk evaluering av nye terapeutiske midler rettet mot disse signalveiene. Capan-1-celler brukes dessuten til å studere biologien til stamceller i bukspyttkjertelkreft, noe som gir innsikt i atferden som driver tilbakefall av kreft og resistens mot konvensjonell behandling.

Vev
Bukspyttkjertelen
Sykdom
Duktalt adenokarsinom
Metastaseområde
Lever
Synonymer
  • CaPan-1
  • CAPAN-1
  • Capan 1
  • CAPAN 1
  • Capan1
  • CAPAN1

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Danner adenokarsinom forenlig med karsinom i bukspyttkjertelgangene
Karyotype
(P7) hypotriploid med abnormaliteter, inkludert diksentrik, brudd, akrosentriske fragmenter, store submetasentriske og subtelosentriske kromosomer pluss en liten markør
Fordoblingstid
60 til 80 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Capan-1 (Cytion katalognummer 300143)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0237

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
P53 negativ
Antigenuttrykk
Blodtype A, Rh+
Isoenzymer
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0311
Mutasjonsprofil
Capan-1-celler bærer en homozygot Kras-mutasjon i kodon12: GGT(Gly) >GTT(Val)
Produkter
Mucin

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
2 x 104 celler/cm2 vil resultere i et 90 % konfluent monolag på omtrent 7 dager.
Væskefornyelse
Hver tredje dag
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
40 år