Gå direkte til indholdet
Capan-1-celler
Væv
Bugspytkirtel
Sygdom
Duktalt adenokarcinom
Metastasested
Lever
Synonymer
CaPan-1, CAPAN-1, Capan 1, CAPAN 1, Capan1, CAPAN1

Dokumenter

Capan-1-celler

Cell line · Varenummer 300143

Capan-1-cellelinjen stammer fra et humant adenokarcinom i bugspytkirtlen og blev etableret ud fra ascitesvæske fra en 40-årig kaukasisk mand. Den blev...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Capan-1-cellelinjen stammer fra et humant adenokarcinom i bugspytkirtlen og blev etableret fra askevæsken fra en 40-årig kaukasisk mand. Den blev første gang karakteriseret i 1975 og er især kendt for sin duktale epitelmorfologi, som minder meget om den i primære bugspytkirteltumorer. Capan-1-celler bruges i vid udstrækning i forskning, der har til formål at forstå biologien i bugspytkirtelkræft, herunder undersøgelser af tumorprogression, metastase og behandlingsresistens. Denne cellelinje er velanset for sin evne til at producere mucin, et karakteristisk træk ved mange adenokarcinomer i bugspytkirtlen, og fungerer således som en model for mucinøs bugspytkirtelkræft.

Genetisk set har Capan-1 mutationer i KRAS-genet, som er typisk for kræft i bugspytkirtlen, samt ændringer i andre kræftrelaterede gener som TP53 og SMAD4. Disse mutationer gør Capan-1-cellelinjen til et værdifuldt redskab til at studere de molekylære mekanismer, der ligger til grund for kræft i bugspytkirtlen, og til præklinisk evaluering af nye terapeutiske midler rettet mod disse veje. Desuden bruges Capan-1-celler til at studere biologien i stamceller fra bugspytkirtelkræft, hvilket giver indsigt i den adfærd, der driver tilbagefald af kræft og modstandsdygtighed over for konventionelle behandlingsformer.

Væv
Bugspytkirtel
Sygdom
Duktalt adenokarcinom
Metastasested
Lever
Synonymer
  • CaPan-1
  • CAPAN-1
  • Capan 1
  • CAPAN 1
  • Capan1
  • CAPAN1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Danner adenokarcinom i overensstemmelse med karcinom i bugspytkirtelkanalen
Karyotype
(P7) hypotriploid med abnormiteter, herunder dicentriske, brud, acrocentriske fragmenter, store submetacentriske og subtelocentriske kromosomer plus en lille markør
Fordoblingstid
60 til 80 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Capan-1 (Cytion katalognummer 300143)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0237

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53 negativ
Antigenudtryk
Blodtype A, Rh+
Isoenzymer
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Fænotypefrekvensprodukt: 0.0311
Mutationsprofil
Capan-1-celler bærer en homozygot Kras-mutation i codon12: GGT(Gly) >GTT(Val)
Produkter
Mucin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 x 104 celler/cm2 vil resultere i et 90 % konfluent monolag på ca. 7 dage.
Væskeudskiftning
Hver 3. dag
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
40 år