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Cellule Capan-1
Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma duttale
Sito metastatico
Fegato
Sinonimi
CaPan-1, CAPAN-1, Capan 1, CAPAN 1, Capan1, CAPAN1

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Cellule Capan-1

Cell line · Codice prodotto 300143

La linea cellulare Capan-1 deriva da un adenocarcinoma pancreatico umano ed è stata isolata dal liquido ascitico di un uomo caucasico di 40 anni. È stata...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare Capan-1 deriva da un adenocarcinoma pancreatico umano ed è stata ottenuta dal liquido ascitico di un uomo caucasico di 40 anni. È stata caratterizzata per la prima volta nel 1975 ed è particolarmente nota per la sua morfologia epiteliale duttale, che ricorda da vicino quella dei tumori pancreatici primari. Le cellule Capan-1 sono ampiamente utilizzate nella ricerca finalizzata alla comprensione della biologia del tumore del pancreas, compresi gli studi sulla progressione del tumore, sulle metastasi e sulla resistenza ai trattamenti. Questa linea cellulare è molto apprezzata per la sua capacità di produrre mucina, una caratteristica di molti adenocarcinomi pancreatici, fungendo così da modello per il cancro pancreatico mucinoso.

Dal punto di vista genetico, Capan-1 presenta mutazioni nel gene KRAS, tipiche del cancro al pancreas, nonché alterazioni in altri geni correlati al cancro, come TP53 e SMAD4. Queste mutazioni rendono la linea cellulare Capan-1 uno strumento prezioso per lo studio dei meccanismi molecolari alla base del cancro al pancreas e per la valutazione preclinica di nuovi agenti terapeutici mirati a queste vie. Inoltre, le cellule Capan-1 sono utilizzate per studiare la biologia delle cellule staminali del tumore del pancreas, offrendo spunti di riflessione sui comportamenti che determinano la recidiva del cancro e la resistenza alle terapie convenzionali.

Tessuto
Pancreas
Malattia
Adenocarcinoma duttale
Sito metastatico
Fegato
Sinonimi
  • CaPan-1
  • CAPAN-1
  • Capan 1
  • CAPAN 1
  • Capan1
  • CAPAN1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Forma adenocarcinoma coerente con il carcinoma del dotto pancreatico
Cariotipo
(P7) ipotriploide con anomalie che comprendono dicentri, rotture, frammenti acrocentrici, cromosomi submetacentrici e subtelocentrici di grandi dimensioni più un minuscolo marker
Tempo di raddoppio
da 60 a 80 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
Capan-1 (numero di catalogo Cytion 300143)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0237

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
P53 negativo
Espressione dell'antigene
Gruppo sanguigno A, Rh+
Isoenzimi
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, G6PD, B, GLO-1, 1-2, Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0311
Profilo mutazionale
Le cellule Capan-1 portano una mutazione Kras omozigote nel codone 12: GGT(Gly) >GTT(Val)
Prodotti
Mucina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2 x 104 cellule/cm2 daranno luogo a un monostrato confluente al 90% in circa 7 giorni.
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3 giorni
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 48 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
40 anni