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Gewebe
Harter Gaumen, Speicheldrüse
Krankheit
Mukopapilläres Karzinom des harten Gaumens
Metastasenherd
Primäre Tumorlokalisation (harter Gaumen)
Synonyme
University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

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UM-HMC-3B

Cell line · Artikelnummer 305715

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

UM-HMC-3B ist eine menschliche Mukoepidermoidkarzinom-Zelllinie, die aus einem primären Mukoepidermoidkarzinom der Speicheldrüsen des harten Gaumens einer 73-jährigen kaukasischen Patientin etabliert wurde. Die Zelllinie ist Teil des „University of Michigan Human Mucoepidermoid Carcinoma (UM-HMC)“-Panels. Wie UM-HMC-1 weist auch UM-HMC-3B die CRTC1-MAML2-Genfusion (MECT1-MAML2) auf, den onkogenen Treiber bei der Mehrheit der mukoepidermoiden Karzinome, die aus einer t(11;19)(q21;p13)-Translokation und die Aktivierung der CREB- und Notch-Signalwege bewirkt.

UM-HMC-3B eignet sich für Untersuchungen zur Biologie von Mukoepidermoidkarzinomen des harten Gaumens und der Speicheldrüsen, zur CRTC1-MAML2-Signalübertragung sowie für vergleichende Analysen mit anderen Zelllinien des UM-HMC-Panels. Zusammen mit UM-HMC-1 und anderen Panel-Mitgliedern ermöglicht UM-HMC-3B die Identifizierung gemeinsamer und unterschiedlicher molekularer Merkmale bei mukoepidermoiden Karzinomen verschiedener anatomischer Lokalisationen, Altersgruppen und Geschlechter. Es eignet sich außerdem für Arzneimittelsensitivitätsassays, die auf Fusions-Onkoproteine und nachgeschaltete CREB/Notch-Effektoren abzielen.

Gewebe
Harter Gaumen, Speicheldrüse
Krankheit
Mukopapilläres Karzinom des harten Gaumens
Metastasenherd
Primäre Tumorlokalisation (harter Gaumen)
Anwendungen
Forschung zum Speicheldrüsenkarzinom; Biologie der CRTC1-MAML2-Fusion; Biologie des MEC des harten Gaumens; CREB/Notch-Signalweg; vergleichende Panel-Studien der UM und HMC; Arzneimittelsensitivitäts-Assays
Synonyme
  • University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
Ohne Gentechnik
Angaben zum GVO-Status
No genetic modification; somatic CRTC1-MAML2 fusion acquired during tumor development
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzellen
Verdopplungszeit
ca. 24 bis 48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
UM-HMC-3B (Cytion-Katalognummer 305715)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_Y472

05Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
Mutation: Genfusion, CRTC1 + HGNC, MAML2, Name(n) = CRTC1-MAML2, MECT1-MAML2.

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Medium entfernen, mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen, mit Accutase bedecken, 8–10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, in Medium resuspendieren, 3 Minuten bei 300×g zentrifugieren, Überstand verwerfen, in frisches Medium ausplattieren.
Split-Verhältnis
1 bis 5
Aussaatdichte
2–4 × 10⁴/cm²
Flüssigkeitswechsel
Alle 2 bis 3 Tage
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
73 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch