Pāriet uz saturu
Audums
Cietais aukslis, siekalu dziedzeris
Slimība
Cietā aukslējuma mukoepidermoidālais karcinoms
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (cietais aukslis)
Sinonīmi
University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

Dokumenti

UM-HMC-3B

Cell line · Preces numurs 305715

€0.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

UM-HMC-3B ir cilvēka mukoepidermoīdās karcinomas šūnu līnija, kas izveidota no primārās mukoepidermoīdās karcinomas, kas konstatēta 73 gadus vecas kaukāziešu izcelsmes sievietes cietā aukslēja siekalu dziedzeros. Šī līnija ir daļa no Mičiganas Universitātes cilvēka mukoepidermoidās karcinomas (UM-HMC) paneļa. Tāpat kā UM-HMC-1, arī UM-HMC-3B satur CRTC1-MAML2 gēnu fūziju (MECT1-MAML2) — onkogēno faktoru, kas ir lielākajā daļā mukoepidermoīdo karcinomu un kas rodas no t(11;19)(q21;p13) translokācijas un veicina CREB un Notch signālceļu aktivāciju.

UM-HMC-3B ir piemērots pētījumos par cietā aukslēja un siekalu dziedzeru mukoepidermoidālo karcinomu bioloģiju, CRTC1-MAML2 signālceļu, kā arī salīdzinošās analīzēs ar citām UM-HMC paneļa līnijām. Kopā ar UM-HMC-1 un citiem paneļa locekļiem UM-HMC-3B ļauj identificēt kopīgas un atšķirīgas molekulārās iezīmes mukoepidermoīdajās karcinomās, kas skar dažādas anatomiskās vietas, kā arī pacientiem dažādā vecumā un abu dzimumu pārstāvjiem. Tā ir piemērota arī zāļu jutības testiem, kas vērsti uz fūzijas onkoproteīniem un CREB/Notch signālceļu efektoriem.

Audums
Cietais aukslis, siekalu dziedzeris
Slimība
Cietā aukslējuma mukoepidermoidālais karcinoms
Metastāžu vieta
Primārā audzēja lokalizācija (cietais aukslis)
Pieteikumi
Pētījumi par siekalu dziedzeru karcinomu; CRTC1-MAML2 fūzijas bioloģija; cietā aukslējas MEC bioloģija; CREB/Notch signālceļš; salīdzinoši pētījumi ar UM-HMC pacientu grupu; zāļu jutības analīzes
Sinonīmi
  • University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; somatic CRTC1-MAML2 fusion acquired during tumor development
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūnas
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 24 līdz 48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
UM-HMC-3B (Cytion kataloga numurs 305715)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_Y472

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: Gēnu saplūšana, CRTC1 + HGNC, MAML2, Nosaukums(-i) = CRTC1-MAML2, MECT1-MAML2.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemiet barotni, nomazgājiet ar PBS bez kalcija un magnija, pārklājiet ar Accutase, inkubējiet 8–10 minūtes istabas temperatūrā, atkārtoti suspendējiet barotnē, centrifugējiet 300×g 3 minūtes, izlejiet supernatantu, pārstādiet svaigā barotnē.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
2–4 × 10⁴/cm²
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 2 līdz 3 dienām
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
73 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis