Pāriet uz saturu
UM-UC-3
Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
UMUC-3, UM-UC3, UMUC3, UC-3, University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

Dokumenti

UM-UC-3

Cell line · Preces numurs 305074

The UM-UC-3 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a high-grade transitional cell carcinoma (TCC), established from a male pati...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

UM-UC-3 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka urīnpūšļa karcinomas, konkrēti no augstas pakāpes pārejas šūnu karcinomas (PŠK), kas iegūta no vīrieša pacienta. Tā ir plaši izmantota vēža pētījumos, jo tai ir spēcīgas augšanas īpašības gan in vitro, gan in vivo. UM-UC-3 šūnām ir epitēlija morfoloģija, un tās ir aneuploīdas, ar modālo hromosomu skaitu no 59 līdz 95. Šīs šūnas spēj veidot audzējus imūnkompromitētām pelēm ar histoloģiskām pazīmēm, kas līdzinās primārajam audzējam, tādējādi uzsverot to lietderību kā preklīnisku urīnpūšļa vēža modeli.

Ģenētiskie un molekulārie pētījumi ir atklājuši būtiskas izmaiņas UM-UC-3 šūnās, tostarp biežas delecijas un mutācijas galvenajos audzēja supresoru gēnos, piemēram, CDKN2A un CDKN2B. Šie gēni atrodas 9p21 reģionā, kas bieži tiek dzēsts urīnpūšļa vēža gadījumā, veicinot šūnu cikla disregulāciju. Turklāt UM-UC-3 ir izmaiņas fosfatidilinozitola 3-kināzes (PI3K) signalizācijas ceļā, kas ir būtisks urīnpūšļa karcinomas audzēja attīstības virzītājspēks. Šīs īpašības padara to par vērtīgu modeli onkogēno signālu ceļu izpētei un mērķterapiju testēšanai.

UM-UC-3 šūnas ir plaši izmantotas terapeitiskos pētījumos, jo īpaši pētot inhibitoru iedarbību uz PI3K/AKT un MAPK signalizācijas ceļiem. Tās tiek izmantotas arī zāļu skrīninga programmās, lai identificētu savienojumus, kas efektīvi iedarbojas uz urīnpūšļa vēzi. Šūnu līnijas ģenētiskā un fenotipiskā stabilitāte vairākkārtējas pasāžas laikā vēl vairāk apstiprina tās kā uzticama pētniecības instrumenta lomu vēža bioloģijā un terapijas izstrādē.

Audums
Urīnpūslis
Slimība
Urīnpūšļa karcinoma
Sinonīmi
  • UMUC-3
  • UM-UC3
  • UMUC3
  • UC-3
  • University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
UM-UC-3 (Cytion kataloga numurs 305074)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1783

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
Vecums nav precizēts
Etniskā piederība
Eiropas