Mine otse sisu juurde
UM-UC-3
Kude
Uriinipõie
Haigus
Põie kartsinoom
Sünonüümid
UMUC-3, UM-UC3, UMUC3, UC-3, University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

Dokumendid

UM-UC-3

Cell line · Toote number 305074

The UM-UC-3 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a high-grade transitional cell carcinoma (TCC), established from a male pati...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

UM-UC-3 rakuliin on saadud inimese põiekartsinoomist, täpsemalt kõrgekvaliteedilisest üleminekurakkude kartsinoomist (TCC), mis on saadud meessoost patsiendilt. Seda on laialdaselt kasutatud vähiuuringutes tänu selle tugevatele kasvuomadustele nii in vitro kui ka in vivo. UM-UC-3 rakkudel on epiteliaalne morfoloogia ja nad on aneuploidsed, nende modaalne kromosoomide arv on vahemikus 59-95. Need rakud on võimelised moodustama immuunpuudulikkusega hiirtel tuumoreid, mille histoloogilised omadused sarnanevad esmase kasvaja omadustega, mis näitab nende kasulikkust põievähi prekliinilise mudelina.

Geneetilised ja molekulaarsed uuringud on näidanud olulisi muutusi UM-UC-3 rakkudes, sealhulgas sagedased deletsioonid ja mutatsioonid peamistes kasvajasupressorgeenides, nagu CDKN2A ja CDKN2B. Need geenid asuvad piirkonnas 9p21, mis on põievähi puhul sageli deletseeritud, aidates kaasa rakutsükli düsregulatsioonile. Lisaks on UM-UC-3-l muutused fosfatidüülinositooli-3-kinase (PI3K) signaaliradu, mis on uroteliaalse kartsinoomi kasvajate tekkimise kriitiline tegur. Need omadused teevad sellest väärtusliku mudeli onkogeensete signaaliradade uurimiseks ja suunatud ravimeetodite testimiseks.

UM-UC-3 rakke on laialdaselt kasutatud terapeutilistes uuringutes, eelkõige PI3K/AKT ja MAPK signaaliradadele suunatud inhibiitorite mõju uurimisel. Neid kasutatakse ka ravimite sõelumisprogrammides, et tuvastada põievähi vastu tõhusaid ühendeid. Rakuliini geneetiline ja fenotüübiline stabiilsus mitme läbimise ajal toetab veelgi selle rolli usaldusväärse uurimisvahendina vähibioloogia ja ravimiarenduse valdkonnas.

Kude
Uriinipõie
Haigus
Põie kartsinoom
Sünonüümid
  • UMUC-3
  • UM-UC3
  • UMUC3
  • UC-3
  • University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
UM-UC-3 (Cytioni katalooginumber 305074)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1783

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
Täpsustamata vanus
Etniline kuuluvus
Euroopa