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UM-UC-3
Tessuto
Vescica urinaria
Malattia
Carcinoma della vescica
Sinonimi
UMUC-3, UM-UC3, UMUC3, UC-3, University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

Documenti

UM-UC-3

Cell line · Codice prodotto 305074

The UM-UC-3 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a high-grade transitional cell carcinoma (TCC), established from a male pati...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare UM-UC-3 deriva da un carcinoma vescicale umano, nello specifico un carcinoma a cellule transizionali (TCC) di alto grado, ottenuto da un paziente maschio. È stata ampiamente utilizzata nella ricerca sul cancro grazie alle sue robuste caratteristiche di crescita, sia in vitro che in vivo. Le cellule UM-UC-3 presentano una morfologia epiteliale e sono aneuploidi, con un numero modale di cromosomi compreso tra 59 e 95. Queste cellule sono in grado di formare tumori. Queste cellule sono in grado di formare tumori in topi immunocompromessi, con caratteristiche istologiche simili al tumore primario, evidenziando la loro utilità come modello preclinico per il cancro della vescica.

Studi genetici e molecolari hanno rivelato alterazioni significative nelle cellule UM-UC-3, tra cui frequenti delezioni e mutazioni in geni soppressori tumorali chiave come CDKN2A e CDKN2B. Questi geni sono localizzati nella regione 9p21, che è comunemente cancellata nel cancro della vescica, contribuendo alla disregolazione del ciclo cellulare. Inoltre, UM-UC-3 presenta alterazioni nella via di segnalazione della fosfatidilinositolo 3-chinasi (PI3K), un fattore critico della tumorigenesi nel carcinoma uroteliale. Queste caratteristiche ne fanno un modello prezioso per studiare le vie di segnalazione oncogeniche e testare terapie mirate.

Le cellule UM-UC-3 sono state ampiamente utilizzate nella ricerca terapeutica, in particolare per esplorare gli effetti degli inibitori che hanno come bersaglio le vie di segnalazione PI3K/AKT e MAPK. Vengono inoltre utilizzate nei programmi di screening farmacologico per identificare composti efficaci contro il tumore della vescica. La stabilità genetica e fenotipica della linea cellulare nel corso di passaggi multipli supporta ulteriormente il suo ruolo di strumento di ricerca affidabile nella biologia del cancro e nello sviluppo terapeutico.

Tessuto
Vescica urinaria
Malattia
Carcinoma della vescica
Sinonimi
  • UMUC-3
  • UM-UC3
  • UMUC3
  • UC-3
  • University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
UM-UC-3 (numero di catalogo Cytion 305074)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1783

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
Età non specificata
Etnia
Europeo