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UM-HMC-3A
Tessuto
Cavità orale, palato duro
Malattia
Carcinoma mucoepidermoide del palato duro
Sinonimi
University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3A

Documenti

UM-HMC-3A

Cell line · Codice prodotto 305717

UM-HMC-3A è una linea cellulare di carcinoma mucoepidermoide umano ottenuta dalla recidiva locale di un tumore delle ghiandole salivari in un paziente adulto, diversi anni fa...

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01Informazioni generali

Descrizione

UM-HMC-3A è una linea cellulare di carcinoma mucoepidermoide umano ottenuta dalla recidiva locale di un tumore delle ghiandole salivari in un paziente adulto, diversi anni dopo la resezione chirurgica della lesione primaria. Fa parte di una coppia di linee cellulari correlate (UM-HMC-3A e UM-HMC-3B) derivate dallo stesso individuo, che rappresentano stadi distinti della progressione della malattia, ovvero la recidiva locale e la metastasi linfonodale. Le cellule UM-HMC-3A mostrano una morfologia stabile di tipo epiteliale in vitro, formando monostrati simili a ciottoli e mantenendo caratteristiche di crescita costanti durante la coltura prolungata, con una propagazione riuscita riportata oltre i 100 passaggi. Il profilo delle ripetizioni in tandem corte conferma la loro origine dal tumore del paziente ed esclude la contaminazione incrociata, a sostegno della loro affidabilità come sistema modello.

UM-HMC-3A dimostra capacità tumorigenica in vivo, formando tumori da xenotrapianto quando impiantata in topi immunodeficienti. Questi xenotrapianti riproducono le caratteristiche istopatologiche chiave del tumore originale del paziente, inclusa la presenza di popolazioni cellulari sia di tipo epidermoide che produttrici di mucina. La colorazione con acido periodico-Schiff (PAS) rivela una produzione di mucopolisaccaridi paragonabile a quella dei tumori umani, indicando una differenziazione funzionale preservata. Rispetto alla sua controparte metastatica (UM-HMC-3B), l'UM-HMC-3A mostra tipicamente una formazione tumorale più lenta e un attecchimento iniziale meno consistente, riflettendo le differenze biologiche associate alla recidiva locale rispetto alla progressione metastatica. L'UM-HMC-3A fornisce un modello prezioso e ben caratterizzato per lo studio della recidiva tumorale, della differenziazione epiteliale e delle risposte terapeutiche nel carcinoma mucoepidermoide delle ghiandole salivari.

Tessuto
Cavità orale, palato duro
Malattia
Carcinoma mucoepidermoide del palato duro
Sinonimi
  • University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3A

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Identificatori

Riferimento bibliografico
UM-HMC-3A (numero di catalogo Cytion 305717)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_Y471

04Espressione e suscettibilità

Profilo mutazionale
Mutazione: fusione genica, CRTC1 + HGNC, MAML2, nome/i = CRTC1-MAML2, MECT1-MAML2.

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
73 anni
Etnia
Caucasico