Siirry sisältöön
UM-UC-3
Kudos
Virtsarakko
Sairaus
Virtsarakon syöpä
Synonyymit
UMUC-3, UM-UC3, UMUC3, UC-3, University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

Asiakirjat

UM-UC-3

Cell line · Tuotenumero 305074

The UM-UC-3 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a high-grade transitional cell carcinoma (TCC), established from a male pati...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

UM-UC-3-solulinja on peräisin ihmisen virtsarakon karsinoomasta, erityisesti korkea-asteisesta siirtymäsolusyövästä (TCC), joka on peräisin miespotilaalta. Sitä on käytetty laajalti syöpätutkimuksessa sen vahvojen kasvuominaisuuksien vuoksi sekä in vitro että in vivo. UM-UC-3-soluilla on epiteelimorfologia, ja ne ovat aneuploideja, ja niiden modaalinen kromosomiluku vaihtelee 59:stä 95:een. Nämä solut kykenevät muodostamaan immunokompromisoituneissa hiirissä kasvaimia, joiden histologiset piirteet muistuttavat primaarikasvainta, mikä korostaa niiden hyödyllisyyttä virtsarakon syövän prekliinisenä mallina.

Geneettiset ja molekyylitutkimukset ovat paljastaneet merkittäviä muutoksia UM-UC-3-soluissa, mukaan lukien usein esiintyviä deletointeja ja mutaatioita keskeisissä kasvainsuppressorigeeneissä, kuten CDKN2A ja CDKN2B. Nämä geenit sijaitsevat 9p21-alueella, joka on yleisesti poistettu virtsarakon syövässä, mikä vaikuttaa osaltaan solusyklin säätelyhäiriöihin. Lisäksi UM-UC-3:ssa on muutoksia fosfatidylinositoli-3-kinaasi (PI3K) -signalointireitillä, joka on uroteelikarsinooman kasvainten synnyn kriittinen aiheuttaja. Nämä ominaisuudet tekevät siitä arvokkaan mallin onkogeenisten signaalireittien tutkimiseen ja kohdennettujen hoitojen testaamiseen.

UM-UC-3-soluja on käytetty laajasti terapeuttisessa tutkimuksessa, erityisesti PI3K/AKT- ja MAPK-signalointireitteihin kohdistuvien inhibiittorien vaikutusten tutkimisessa. Niitä käytetään myös lääkkeiden seulontaohjelmissa virtsarakon syöpää vastaan tehokkaiden yhdisteiden tunnistamiseksi. Solulinjan geneettinen ja fenotyyppinen vakaus useiden läpikäyntien aikana tukee entisestään sen asemaa luotettavana tutkimusvälineenä syövän biologiassa ja terapeuttisessa kehityksessä.

Kudos
Virtsarakko
Sairaus
Virtsarakon syöpä
Synonyymit
  • UMUC-3
  • UM-UC3
  • UMUC3
  • UC-3
  • University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä

04Tunnisteet

Lähdeviite
UM-UC-3 (Cytionin luettelonumero 305074)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1783

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Ikä määrittelemätön
Etnisyys
Eurooppalainen