Przejdź do treści
UM-UC-3
Chusteczka
Pęcherz moczowy
Choroba
Rak pęcherza moczowego
Synonimy
UMUC-3, UM-UC3, UMUC3, UC-3, University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

Dokumenty

UM-UC-3

Cell line · Numer produktu 305074

The UM-UC-3 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a high-grade transitional cell carcinoma (TCC), established from a male pati...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa UM-UC-3 wywodzi się z ludzkiego raka pęcherza moczowego, w szczególności raka przejściowokomórkowego (TCC) o wysokim stopniu złośliwości, pochodzącego od pacjenta płci męskiej. Jest ona szeroko stosowana w badaniach nad rakiem ze względu na jej silne właściwości wzrostu, zarówno in vitro, jak i in vivo. Komórki UM-UC-3 wykazują morfologię nabłonkową i są aneuploidalne, z modalną liczbą chromosomów w zakresie od 59 do 95. Komórki te są zdolne do tworzenia guzów u myszy z obniżoną odpornością, z cechami histologicznymi przypominającymi guz pierwotny, co podkreśla ich użyteczność jako przedklinicznego modelu raka pęcherza moczowego.

Badania genetyczne i molekularne ujawniły znaczące zmiany w komórkach UM-UC-3, w tym częste delecje i mutacje w kluczowych genach supresorowych nowotworów, takich jak CDKN2A i CDKN2B. Geny te są zlokalizowane w regionie 9p21, który jest powszechnie usuwany w raku pęcherza moczowego, przyczyniając się do rozregulowania cyklu komórkowego. Dodatkowo, UM-UC-3 wykazuje zmiany w szlaku sygnałowym kinazy fosfatydyloinozytolu 3 (PI3K), krytycznego czynnika napędzającego nowotworzenie w raku urotelialnym. Cechy te sprawiają, że jest to cenny model do badania onkogennych szlaków sygnałowych i testowania terapii celowanych.

Komórki UM-UC-3 były szeroko wykorzystywane w badaniach terapeutycznych, w szczególności w badaniu wpływu inhibitorów ukierunkowanych na szlaki sygnałowe PI3K/AKT i MAPK. Są one również wykorzystywane w programach badań przesiewowych leków w celu identyfikacji związków skutecznych przeciwko rakowi pęcherza moczowego. Stabilność genetyczna i fenotypowa linii komórkowej w wielu pasażach dodatkowo wspiera jej rolę jako niezawodnego narzędzia badawczego w biologii nowotworów i rozwoju terapii.

Chusteczka
Pęcherz moczowy
Choroba
Rak pęcherza moczowego
Synonimy
  • UMUC-3
  • UM-UC3
  • UMUC3
  • UC-3
  • University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Nabłonek
Nowotworotwórczy
Tak

04Identyfikatory

Źródło
UM-UC-3 (numer katalogowy Cytion 305074)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1783

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
Wiek nieokreślony
Pochodzenie etniczne
Europejski